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2. Isolierung der Chrom atophoren mit Flußsäure. 



Die allgemeine Abneigung gegen meine Methode, die Chromatophoren der Cyano- 

 phyceen mit Flußsäure darzustellen, veranlaßt mich, diesmal etwas eingehender als früher 

 (I, S. 26), die Wirkung der Flußsäure an solchen Objekten zu behandeln, deren Chromato- 

 phoren gut bekannt sind. Ein Blick auf die Abbildungen 4 — 8 wird hoffentlich dazu bei- 

 tragen, meiner Schilderung der Cyanophyceenchromatophoren eine bessere Aufnahme als 

 früher vorzubereiten. 



1. Wirkung der Flußsäure auf bekannte Chromatophoren. 



Methode: Die käufliche Flußsäure hat annähernd eine Konzentration von 50^, eine 

 von Merck bezogene, mit der die meisten neueren Versuche ausgeführt wurden, trug 

 die Bezeichnung 55_%\ Diese Konzentration hat sich als zu stark erwiesen, am vorteil- 

 haftesten war 40^, man kann auch bis 45^ herauf-, bis 30^ herabgehen. Für diese 

 Konzentrationen fand ich folgende Methode am besten: Der Platintiegel mit der Flußsäure 

 wird auf hohem Dreifuß aufgestellt, und bevor das lebende Objekt hineingebracht wird, 

 eine hohe Bunsenflamme daneben bereit gehalten. Nachdem das Objekt in die Säure 

 gebracht ist, wobei Algenmassen vorher auf Fließpapier abzutupfen sind, wird der Tiegel 

 mit Deckel bedeckt und vorsichtig erwärmt. Man hält den Bunsenbrenner in der Hand 

 und fährt mit der großen Flamme rhythmisch unter den Tiegel, bis drei bis vier (fünf) 

 kurze Aufstöße der Flüssigkeit hörbar gewesen sind. Sofort nimmt man mit Platindraht 

 oder geeigneter Pinzette das Material heraus und wäscht es in einer großen Schale mit 

 ruhigem Wasser gut aus. Um schöne Färbungen zu erhalten, empfiehlt es sich, mehrere 

 Stunden bis einen Tag lang auszuwaschen. Bei richtiger Behandlung bleiben die Algenfäden, 

 Aveil die Zellulose nicht zerstört wird, ganz, und lassen sich bequem weiter bearbeiten. Das 

 ausgewaschene Material gelangt in eine 1 oder 1% ige wäßrige Lösung von Lichtgrün, wo- 

 durch die Chromatophoren eine fast natürliche Färbung annehmen. Man erhält so schöne 

 Präparate, daß man sie zu Vorlesungsdemonstrationen benutzen kann. In Lichtgrün darf 

 nicht kürzer als zwei Stunden gefärbt werden, nicht länger als vier Stunden, damit die 

 Zellwände sich nicht zu stark färben und beim langsamen Entwässern in Alkohol wieder 

 ganz entfärben. Überführung durch steigenden Alkohol, Alkohol-Xylol, Xylol, Balsam. 

 Statt Lichtgrün kann auch mit Säurefuchsin oder mit basischen Farben, wie Gentianaviolett, 

 gefärbt werden. Methylgrün, mit Amylalkohol gereinigt, spricht nur an, wenn es mit Borax 

 (vgl. Fischer II, S. 93) versetzt ist, liefert aber dann Präparate, deren Färbung bei blau- 

 grünen Algen durch größte Natürlichkeit überrascht. Am bequemsten und für Chlorophyceen 

 sicher am schönsten ist Lichtgrün. 



Weniger vorteilhaft ist es, die Flußsäure längere Zeit, aber kalt wirken zu lassen, 

 an Spirogyra wurde 10 und 30 Minuten geprüft, in beiden Fällen waren zwar die Bänder 

 gut konserviert, aber das Protoplasma war noch nicht gelöst. 



Begründung der Methode. Durch Zufall bin ich früher darauf aufmerksam ge- 

 worden, daß die verdünnte Flußsäure beim kurzen Aufwallen alles in der Zelle löst und 

 nur die Chromatophoren, umgeben von der Zellwaud übrig bleiben. Ich wollte damals die 

 sternförmigen Körperchen im Zentralkörper von Oscillaria tenuis auf Kieselgehalt prüfen. 



Keiner besonderen Erklärung bedarf es, daß Cytoplasma und Kern in heißer Fluß- 

 säure gelöst werden, auch die Unlöslichkeit der Zellulosemembran folgt aus bekannten Eigen- 

 schaften der Zellulose. Dagegen bedarf der Schutz, den das plasmatische Stroma der 

 Chromatophoren durch den Chlorophyllfarbstoff erfährt, noch einer näheren Untersuchung. 



