— 232 — 



bakterien auf ; auch farblose Flagellaten fühlen sich äußerst wohl in solchen Faulflüssigkeiten. 

 Das Chitin wird angegriffen und zersetzt, doch in den meisten Fällen langsamer, als wenn 

 Pepton fehlt, sei es nun deshalb, weil die chitin^ersetzenden Formen zuerst das Pepton, 

 dann erst das Chitin vertilgen, sei es deshalb, weil sie zuerst durch Fäulnisbakterien in 

 ihrer Tätigkeit gehemmt werden, sei es, weil beide Gründe zusammenkommen. 



Zu ähnlichen Ergebnissen führen Chitinrohkulturen, denen gleichzeitig Zucker und 

 Pepton zugefügt wird; man beobachtet Bildung einer Kahmhaut, die aus Dematien und 

 Bakterien besteht, massenhafte in der Lösung umherschwärmende Bakterien und allmähliche 

 Zerstörung des Chitins. Die Reaktion wird nicht so stark alkalisch als in Kulturen, die 

 außer dem Chitin nur Pepton führen. 



Dieser Befund im kleinen, — zeitweilige Deckung des Chitins durch Pepton — , 

 stimmt überein mit den Erfahrungen der Landwirte, daß beim Düngen mit Maikäfern u. a. 

 die Chitinteile bedeutend länger erhalten bleiben als die andern Leibesbestandteile. Das- 

 selbe kann man beobachten, wenn man Seewasser, welches große Mengen Planktoncopepoden 

 enthält, faulen läßt; man sieht alsdann, wie zuerst die Inhaltsbestandteile, Eiweifskörper 

 usf. der Copepoden schwinden, dann erst die Panzer angegriffen werden. 



Zu Reinkulturen gelangt man von Rohkulturen leicht auf die folgende Weise: 

 man stellt Nähragar her, welcher enthält: l 1 2 °/o Gelose, d. h. mit Säure und 

 Ammoniak gereinigten käuflichen Agar 1 ), je 0,03 °/o Dikaliumphosphat und Magnesium- 

 sulfat und IV2 °/o Kochsalz, d. h. dieselben Salze wie die Rohkulturen, und fügt 

 gefälltes, möglichst feinzerriebenes Chitin hinzu. Der Agar wird sterilisiert, mit einer 

 Spur einer Rohkultur beimpft und in gewohnter Weise in Petri-Schalen ausgegossen. Noch 

 bessere Resultate erhält man, wenn man das Chitin für sich im Trockenschrank sterilisiert 

 und auf die beimpften und in die Schalen ausgegossenen Agarplatten erst im Augenblicke 

 des Erstarrens aufstreut; die Chitinteilchen sinken dann nicht tief in den Agar ein, und 

 die sich an denselben entwickelnden Bakterien genießen reichlichen Luftzutritt. Hat man 

 zu stark beimpft oder zuviel Chitin zugesetzt, so überzieht sich in kurzer Zeit die ganze 

 Agaroberfläche mit einer runzeligen Kahmhaut; vermeidet man aber diese Fehler, so sieht 

 man bald jedes Chitinbröckchen sich mit einem bräunlichgelben Hofe umgeben, der allseitig 

 in den Agar feine Ausstrahlungen entsendet. Ein recht kleines, mit möglichst schmalem 

 Bakterienhof umgebenes Chitinstückchen impft man, am besten mittels einer Kapillarröhre, 

 auf eine neue Agarplatte von derselben Zusammensetzung; und wenn man von dieser 

 wiederum ein umwachsenes Stückchen abimpft und in sterile Nährlösung überträgt, kann 

 man nach meinen Erfahrungen ziemlich sicher sein, eine Reinkultur zu erhalten. Da es 

 aber immerhin schwer ist, sich mit Sicherheit davon zu überzeugen, daß sämtliche ein 

 Chitinstück umwachsende Individuen von einer einzigen Zelle abstammen, ist es besser, von 

 der zweiten Agarplatte nochmals auf Agar zu überimpfen, welcher statt des Chitins 

 eine Spur Pepton enthält; auf diesem Peptonagar entwickelt sich der chitinzersetzende 

 Spaltpilz ausgezeichnet in Form größerer oberflächlicher und kleinerer submerser Kolonien, 

 und kann von einer solchen, — man wählt eine möglichst kleine aus, die man vorher mikros- 

 kopisch kontrolliert, — mit vollkommener Sicherheit rein abgeimpft werden. 



Betrachten wir nun zunächst den äußerlichen Anblick solcher Reinkultur während 

 ihrer Entwicklung in genau derselben Nährlösung, welche bereits für die Rohkulturen 

 Verwendung fand 2 ): das erste Zeichen des beginnenden Bakterienlebens ist ein sehr 



!) Vgl. Wiesner, Kohstofte, 1900, Bd. I. S. 646. 



2 ) Als Nährsalze wurden also stets Dikaliphospliat und Magnesiumsulfat geboten; Zusatz eines 

 Kalksalzes (CaSO, CaCl 2 ) hatte keine fördernde Wirkung. — Es sei noch anmerkungBweise erwähnt, 



