AbADEMIA DE CIENCIAS DE LA HABANA áÍ5 



en que el rojo indica valores iguales a los que clan so- 

 luciones, entre 6 y 7.4 de fosfato. Hav estuches hov 

 en el mercado con soluciones standard que sirven pa- 

 ra el objeto. 



Si el medio, j)or el contrario, tiene una alcalini- 

 dad algo más fuerte, — aunque sea pequeña la dife- 

 rencia—el indicador tomará un tinte rojo más inten- 

 so, algo azuloso. Este tinte, se liará cambiar hasta la 

 intensidad del color deseado, agregando al medio, por 

 gotas, una solución de N|1U o N|20 de ácido clorhí- 

 drico, o una solución de peptona al 10%. Conocido 

 cuanto requirieron los 5 c.c. para ajustarse a la pro- 

 pia reacción, se calculará lo que hay que agregar a la 

 totalidad del medio, que entonces se reparte en tubos, 

 esterilizándolos al autoclave. 



Es indispensable para cultivar los leptospiras, 

 que se agreguen de 10 a 20 c.c. de suero, por cada 100 

 c.c. del medio semisólido antes descrito. Los sueros 

 que he utilizado con magnífico éxito fueron : de cone- 

 jo, óptimo, señalado por Noguchi para cultivos de 

 larga duración; humanos, los tomé siempre de casos 

 no inmunes a la fiebre amarilla y de curiel, con muy 

 buenos resultados. Noguchi empleó otros sueros, con 

 buen éxito, en cuanto a siembras, pero no en cuanto 

 a duración de éstas. 



La manipulación del suero requiere el mayor cui- 

 dado, pues como no puede sufrir esterilización, ha de 

 obtenerse con absoluta asepsia. Para que el suero se 

 mezcle bien con el medio, caliento previamente el me- 

 dio en bañomaría, hasta estar bien fundido y vierto 

 el suero cuando baja la temperatura a 45'' C. 



Terminada la XDreparación se tapan los tubos con 

 capotas de goma, o se les agrega una gruesa capa de 

 aceite de parafina, para impedir la evaporación, y se 

 dejan 24 horas en la estufa, a 37", para separar aque- 

 llos que se hubieran contaminado. Oonsérvanse des- 

 pués en el refrigerador. 



Los cultivos se hacen, utilizando sangre de ca- 

 sos infectados, o utilizando otros cultivos. 



Recordemos que para lograr efectivos culti^'os 

 utilizando la sangre infectada, debemos citratarla, 

 con objeto de que se conserve fluida. 



