XX, 3. Colombo : Di un raetodo per tingere i granuli protoplasmatici. 283 



il Prof. G. Martinotti — ad un altra sostanza colorante prima d'ora, 

 che io mi sappia, non usata per tingere in vita le granulazioni cito- 

 plasmatiche degli elementi corneali, il Bruno di Bismarok. 



Primo a servirsi di questo colore per la colorazione „intra-vitam" 

 di organismi monocellulari fu il Brandt (1878 — N° 3 della Bibl.) : 

 se ne valsero in seguito l'Henneguy per colorire infusorii , cellule 

 isolate, e tessuti vegetali ed animali viventi (N° 4 della Bibl.), e lo 

 Pfeffer per tingere in vita cellule vegetali (N° 5 della Bibl.). 

 G. Martinotti coloro girini di rana mantenendoli in una soluzione 

 diluitissima del Bruno di Bismarok (N° 6 della Bibl.); il Galeotti 

 iniettandone una soluzione nel cavo peritoneale di salamandre ottenne, 

 tranne che per il sistema nervoso, risultati simili a quelli forniti dal 

 bleu di metilene (ß° 7 della Bibl.) ; il Loisel usö il Bruno di Bis- 

 marok per la colorazione vitale di una larva di dittero e per quella 

 delle spugne (N° 8 della Bibl.), l'Arnold per la colorazione vitale 

 e „sopravitale" dei leucociti (N° 9 della Bibl.), il Fischel per tingere 

 intra-vitam larve di salamandra col metodo usato gia allo stesso 

 scopo dal Martinotti (N° 10 della Bibl.). 



Fin dalle prime esperienze che io feci introducendo granelli del 

 Bruno di Bismarok nel sacco congiuntivale delle rane colla stessa 

 tecnica che 1'Arnold ha proposto per il rosso neutro e per il bleu 

 di metilene (N° 1 1 della Bibl.) , ebbi a convincermi che l'affinitä 

 cromatica dei granuli degli elementi cellulari della Cornea e , per il 

 Bruno di Bismarok, assai minore che per gii altri due colori ora men- 

 zionati. 



Nell'uso protratto del Bruno di Bismarok in granelli od in pol- 

 vere non essendo opportuno insistere per le lesioui deirepitelio cor- 

 neale che quasi sempre ne conseguono, mi convenne di modificare la 

 tecnica della colorazione nel modo seguente : 



Una soluzione di cloruro di sodio al 0'92 °/ si satura a caldo 

 con Bruno di Bismarok : si filtra a caldo ; si Ultra nuovamente a 

 freddo ; si sterilizza a bagno-maria per un'ora, e quindi si instilla a 

 goccie nel sacco congiuntivale della rana ponendo mente a che il 

 liquido rimanga per qualche secondo in contatto colla superficie della 

 cornea. Io uso praticare , ad eguali intervalli di tempo , quattro 

 instillazioni al giorno , e ciascuna volta instillo cinque goccie : dopo 

 tre o quattro giorni di questo trattamento l'awenuta colorazione dei 

 granuli si riconosce macroscopicamente perche la Cornea assume in 

 totalita un colore giallo-bruno : a questo punto se si esporta la cornea 

 e si esamina immediatamente nella soluzione fisiologica comune , si 



