I, 2. Hansen: lieber d. Zählen mikrosk. Gegenstände in d. Botanik. 205 



dann einen Tropfen so stark mit sterilisirtem, destillirten Wasser, dass 

 im Durchschnitt auf 5 bis 10 Tropfen der verdünnten, gut gemischten 

 Flüssigkeit eine Spaltpilzzelle kommt. Man säet dann in eine Serie von 

 ca. 50 mit Culturflüssigkeit beschickten und sterilisirteu Kölbchen je 

 einen Tropfen aus und setzt sie alsdann in einen Thermostaten von 37 °. 

 Von den 50 Kölbchen werden im Laufe der nächsten drei Wochen 5 

 bis 10 Kölbchen Pilzentwicklung zeigen". Er nimmt nun an, dass ein 

 jeder dieser Kolben nur eine Zelle erhalten hat. Dies mag freilich wahr- 

 scheinlich sein, aber bei genauer Prüfung zeigt es sich doch, dass diese 

 Methode ganz zuverlässig nicht genannt werden kann. Derselbe Ein- 

 wand gilt auch für Nägeli's und Bucm»EK's Culturen. 



Gleichzeitig mit den vorhergehenden Forschern verbesserte ich die 

 Verdünmmgsmethode auf eine solche Art, dass ich durch dieselbe Rein- 

 culturen für meine „Untersuchungen über die Physiologie und Morpho- 

 logie der Alkoholgährungspilze" bekommen konnte '. In Pasteue's zwei- 

 halsigen Kolben (Figur 6), in welchem Wasser durch Kochen sterilisirt 

 und dann wieder abgekühlt worden war, brachte ich ein wenig von der 

 Hefe, von welcher ich eine Reincultur zu erhalten wünschte. Bei vorberei- 

 tenden Culturen hatte ich stets dafür gesorgt, dass die Cultur nicht nur aus 

 jungen, kräftigen Zellen bestand, sondern auch, soweit es möglich war, 

 dass Zellen der gewünschten Art die Ober- 

 hand hatten. Durch ziemlich starkes 

 Schütteln wurden die Zellen im Wasser 

 gleichmässig vertheilt. Proben wurden 

 dann herausgenommen, damit ich durch 

 Zählung mit dem Hämatimeter bestimmen 

 konnte, wie viele Zellen sich in 1 Cubik- 

 centimeter der Wassermischung befanden. 

 Hieraus wurde durch Berechnung be- 

 stimmt, in welchem Maasse die Verdün- 

 nung fortgesetzt werden durfte, um in 

 1 Cubikcentimeter der endlichen Wasser- 

 mischung zuletzt z. B. 0-5 Zellen zu 

 haben. Von einer Reihe Aussaaten, jede 

 von 1 Cubikcentimeter sollte also nur 



jede zweite eine Hefezelle beherbergen. Um also diese Verdünnung 

 mit hinreichender Genauigkeit und ohne in stärkerem Maasse einer 



») Hansen , Compte - rendu des traveaux du Laboratoüre de Carlsberg 

 1881—83. 



