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C. Mikroorganisfiien. 



Riegel, W., Ein ein fa ches Verfahren zur Sc Im eil färbung 

 von Ruhramöben zu diagnostischen Zwecken 

 (Arch. f. Schiffs- u. Tropenhyg. Bd. 22, 1918, S. 217—269 

 m. 1 Tfl.). 



Das vom Verf. in erster Linie zu diagnostischen Zwecken aus- 

 gearbeitete Verfahren gestattet in wenigen Minuten in halbfeuchten 

 Präparaten von Stuhl oder Eiter parasitische Amöben und ihre 

 Zysten in besonderer Färbung gegenüber der Umgebung darzustellen. 

 Dauerpräparate lassen sich mit der angegebenen Methode nicht er- 

 zielen. 



Das Verfahren beruht im wesentlichen auf folgenden Punkten: 

 aus wässerigen alkalischen rotstichigen Methylenblaulösungeu lassen 

 sich durch Chloroform rotviolette Farbstoffe ausschütteln. Chloroform 

 durchdringt äußerst rasch viele organische Dinge, tötet lebende Ob- 

 jekte ab und bewirkt zusammen mit den Farbstoffen gleichzeitig eine 

 gewisse Fixierung sowie Färbung von Zellen und Härtung dünner 

 Schichten, es mischt sich mit harzigen Einschlußmitteln und flüssigem 

 Paraffin ohne Trübung. 



Die Ausführung gestaltet sich folgendermaßen: 1 ccm einer 

 Manson- Lösung (5 g Borax, 2 g Methylenblau medic. Höchst, gelöst 

 in 100 ccm, kochend heißem destilliertem Wasser gebrauchsfertig 

 nach dem Erkalten) wird im Reagenzglase mit 4 bis 5 ccm Chloro- 

 form ^l„ Minute kräftig geschüttelt, dann mit Chloroform auf 10 ccm 

 aufgefüllt. Das tief rot violette Chloroform wird mit einer Pipette 

 vorsichtig abgesaugt und durch Filter in ein Färbegefäß (kleine 

 Petrischale, Blockschälchen) filtriert, ohne daß Reste wässeriger Flüssig- 

 keit , die die Färbung später stören würden , dem Chloroform bei- 

 gemengt sind. 



Das zu untersuchende Material (event. nach Verdünnung mit 

 Wasser oder Kochsalzlösung) wird in dünner, gleichmäßiger Schicht 

 auf ein Deckglas ausgestrichen, das mit der Schicht nach oben für 

 20 bis 40 Sekunden in die Farblösung eingetaucht wird. Überschüssige 

 Farblösung kann mit reinem Chloroform abgespült werden ; noch feucht 

 wird das Präparat in flüssigem Paraffin eingeschlossen. Untersuchung 

 mit Trockensystemen und Immei'sion. 



Wesentlich für den 'Ausfall der Färbung ist die Beschaffenheit 

 des Chloroforms. Zersetztes Chloroform ist unbrauchbar und ist daran 

 zu erkennen, daß die Ausschüttelung der MANSON-Lösung nicht rot, 

 sondern blau aussieht. Das Alter der MANSON-Lösung spielt keine 

 wesentliche Rolle, auch ein Jahr alte Lösungen gaben noch gute Resul- 

 tate. Vorratsmengen der Ausschüttelung selbst bieten bei der schnellen 

 Herstellung der Gebrauchsmenge keine Vorteile, frische Ausschütte- 

 lungen färben stets besser als ältere. An Stelle von Paraffin kann 



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