VII, 4. Referate und Besprechungen. 537 



festem Nährboden, zu denen grössere Mengen des Bodensatzes verwen- 

 det wurden, schlugen auch jetzt fehl und lieferten nur Colonien der Or- 

 ganismen des Oberflächenhäutchens. Um diese störenden Organismen 

 aus der Versuchsflüssigkeit selbst zu entfernen, wurden nunmehr Ver- 

 suche mit Nährflüssigkeiten eingeleitet, in denen auch die letzten 

 Spuren organischer Substanz fehlten ; eine Forderung, die indess nur zu 

 erfüllen ist, wenn man sich die erforderlichen Salze selbst unter den 

 nöthigen Vorsichtsmaassregeln herstellt, weil die „reinen" Ammoniak- 

 salze des Handels oft noch organische Basen enthalten ; als kohlensaure 

 Base wurde diesmal calcinirtes und von neuem mit Kohlensäure gesät- 

 tigtes Calciumcarbonat verwendet. Das Resultat der so abgeänderten 

 Versuche war überraschend : Die Nitrification begann eben so rasch und 

 dauerte mit derselben Intensität an wie vorher, das mikroskopische Bild 

 des Bodensatzes war das gleiche. Schon nach der zweiten Versuchs- 

 reihe liess sich durch die Gelatineplatte erweisen, dass die 4 ersten der 

 accessorischen Mikroorganismen völlig verschwunden waren, nur der 

 Sprosspilz blieb dauernd, wenn auch in geringen Mengen (20,000 Keime 

 pro cc), auch bei den folgenden Versuchsreihen ; er erschien erst am 

 6. Tage auf den Gelatineplatten und seine Colonien wuchsen ausser- 

 ordentlich langsam ; eine wiederholte Prüfung desselben auf eventuelles 

 Nitrificationsvermögen ergab stets ein völlig negatives Resultat, und so 

 war endlich der nitrificirende Organismus mit völliger Sicherheit er- 

 kannt. Das Gelatineverfahren, weit entfernt, diesen Organismus zu 

 isoliren, ist im Gegentheil das beste Mittel , um ein Bacteriengemisch, 

 das ihn enthält, von ihm zu befreien. Um schliesslich auch die letzten 

 Spuren von Verunreinigungen abzuscheiden, wurde die Eigenschaft der 

 nitrificirenden Bacterien, auf Gelatine nicht zu wachsen, im umgekehrten 

 Sinne benutzt: Mit einer Capillare wurden in der erwähnten Weise mit 

 blossem Auge erkennbare Grundproben einer nitrificirten Flüssigkeit 

 entnommen, dieselben in einen Ballon mit sterilisirtem Wasser entleert, 

 hier von neuem mittels einer Capillare aufgenommen und dann in ein- 

 zelnen Tröpfchen auf feste Gelatine in PETEi'scheu Glasdosen entleert. 

 Diese Culturgläser blieben 10 Tage bei 18", die Stellen, wo Flecken, 

 der Grundprobe deponirt waren, Hessen sich an den kleinen Kalkkry- 

 stallen leicht erkennen, und stets blieb eine genügende Zahl dieser 

 Flecken völlig frei von Colonien des fremden Sprosspilzes. Mit solchen 

 steril gebliebenen Flecken, die also das nitrificirende Bacterium rein 

 enthielten, wurden 6 Versuchskolben geimpft 5 in allen trat Nitrification 

 ein, und alle enthielten sie keine fremden Organismen mehr. Allerdings 

 dauerte es 3 Wochen, bis die Nitrification erkennbar wurde, was sich 



