48 J. DAUPHIN 



cette étude, à les signaler tout simplement si je n'avais pu 

 observer directement quelques états de leur développement. 



L'observation directe ne permet pas de les étudier convena- 

 blement, à moins d'avoir affaire h des organes très jeunes, et 

 ma première idée a été d'en faire des coupes. La méthode des 

 coupesestextremementdélicate à employer avec les Mortiérellées 

 et les auteurs qui, comme Léger, les ont pratiquées, n'en ont 

 obtenu que de médiocres résultats. Brefeld n'indique rien sur 

 son mode opératoire. J'ai essayé le mode de fixation assez sim- 

 ple, préconisé par Léger [18]. Il consiste à fixer les organes dans 

 l'alcool oi^i on les laisse séjourner pendant quelques jours; puis 

 on les transporte dans un tube dans lequel on verse quelques 

 centimètres cubes de collodion, de telle sorte que la préparation 

 à inclure soit complètement recouverte, et on ferme le tube 

 avec un bouchon dans lequel on a taillé une petite gouttière 

 permettant la communication avec l'extérieur. 



L'éther du collodion, en s'évaporant lentement, laisse une 

 masse résiduelle contenant l'objet à étudier et que l'on peut 

 alors facilement couper au microtome et colorer ensuite. Cette 

 méthode, qui réussit bien pour les coupes de spores et de 

 mycélium de Mucorinées, ne m'a pas donné de résultats conve- 

 nables pour la recherche que je poursuivais. 



J'ai essayé d'une autre méthode, plus longue et plus minu- 

 nutieuse peut-être, et qui en me donnant un meilleur résultat, 

 m'a permis de faire quelques dessins à la chambre claire. 

 Malheureusement, ces préparations ne se conservent pas, 

 et la difficulté réside toujours pour ces opérations, dans la 

 délicatesse des tissus sur lesquels on opère, et que le rasoir le 

 meilleur écrase toujours plus ou moins. 



Je fixe les tissus, y compris les spores, chlamydospores et zygo- 

 spores, en les laissant séjourner un temps variable soit dans le 

 liquide de Flemming, soit dans le picroformol. Je les retire 

 ensuite et les lave d'abord à l'alcool faible iodé, puis à des alcools 

 de plus en plus concentrés, jusqu'à l'alcool absolu. Je les laisse 

 vingt-quatre heures dans falcool à 90°, quarante-huit heures 

 dans l'alcool absolu. Je les passe ensuite dans le chloroforme 

 pur, après les avoir ainsi déshydratés, puis dans le chloro- 

 forme parafliné. Enfin, pour l'inclusion définitive, je les laisse 



