HECHERCHES SUR LA RÉDUCTION DES NITRATES. 241 



l.c bluu du inélliylciic et le brun de phéiiylùiie sont ub.soi'hés 

 lenLcinenl et ne donnent que des colorations peu intenses. 



Les violets de méthyle et de gentiane donnent au contraire d'ex- 

 cellents résultats, mais le second est d'un emploi un pou plus avan- 

 tageux (jue le premier. 



Si la préparation colorée ne doit pas être conservée, il suffit de 

 mélanger une goutte de liquide de culture avec une très petite 

 quantité de solution de violet de gentiane à 0.5 p. H 10. Gela con- 

 vient très bien pour l'observation des spores. 



Si, au contraire, la préparation est destinée à être conservée, on 

 étale à l'aide d'un fil de platine une très petite goutte de liquide 

 contenant les bactéries sur une lamelle couvre-objet ou mieux sui- 

 une lame |)orte-objct, préalablement débarrassées des })lus infimes 

 traces de matières grasses par un lavage à l'étber alcoolisé. Il con- 

 vient de les cbaufl'er légèrement versoO" ou 35" avant d'y déposer le 

 liquide de culture. 



L'évaporation de la goutte étant terminée, on passe à plusieurs 

 reprises la lame dans la llamme d'une lanqie à alcool de façon à la 

 porter à une température un ])eu supérieure à 60°. Après refioi- 

 dissement, on met une ou deux gouttes de solution aqueuse de vio- 

 let de gentiane à 1 p. 100, et on laisse en contact pendant 5 à 10 

 minutes. L'excès de matière colorante est ensuite entraîné par un 

 lavage à l'eau distillée; la durée du lavage ne doit pas dépasser 

 une minute avec une préparation en couche mince et régulière, si 

 l'on tient à avoir une coloration intense. 



25. La préparation ainsi obtenue peut être étudiée dans l'eau ou 

 montée après dessiccation. Pour cette dernière opération, on peut 

 faire usage de baume de Canada; inais cette substance, employée 

 seule ou mélangée à un lluidifiant, a l'inconvénient de pAlir la teinte 

 du microbe et de rendre celui-ci moins net. La glycérine le décolore 

 en dissolvant le violet de gentiane; la solution d'acétate de potasse 

 agit de même, quoiqu'à un degré moindre. 



Nous préférons faire usage d'une solution concentrée de chlo- 

 rure de calcium dans laquelle le violet de gentiane est complètement 

 insoluble. (Juand on enq)loie ce dernier lifjuide, il est très avan- 

 tageux de fixer la préparation, contrairement à l'usage, sur la lame 



A.N.N. SCIENCE AGIlON. 16 



