Neurofilaments et neurofibrilles 

 dans les fibres nervetises cle la Sangsue 



R. COUTEAUX 



Lahoratoire de Biologic aniiimle (P.C.B.) , Faciilte cles Sciences, Paris, et 

 Laboiatoire de Micioscopie electroiiique appliqiiee a la Biologic (C.N.R.S.) 



BiEN avant F introduction du microscope electro- 

 nique en Cytologic nerveuse, le probleme de la 

 nature des neurofibrilles avait deja fait Pobjet de 

 nombreux debats, mais la mise en evidence au 

 cours de ces dernieres annees, a Taide de ce nouvel 

 instrument, de neurofilaments submicroscopiques a 

 nettcment fait prevaloir Topinion que les neurofibril- 

 les se forment au cours de la fixation par I'agglutina- 

 tion en faisceaux de ces neurofilaments. Cette inter- 

 pretation, quoique tres probable, a encore besoin 

 d'etre etayee par des observations positives. Les 

 neurofibrilles des cellules nerveuses de la Sangsue 

 que les recherches d'Apathy, Cajal et Nageotte ont 

 rendues depuis longtemps classiques nous ont paru 

 pour aborder ce probleme un materiel particuliere- 

 ment favorable et nous exposerons ci-dessous, tres 

 sommairement, les premieres observations que nous 

 avons pu faire sur la chaine nerveuse ventrale de cet 

 animal. 



Materiel et technique. — C'est principalement sur les 

 fibres nerveuses, amyeliniques, de la Sangsue (Hiriido 

 medicinalis) qu'ont porte nos observations, les neurofib- 

 rilles presentant a ce niveau une orientation particuliere- 

 ment simple qui facilite beaucoup I'interpretation des 

 coupes ultraminces. Ces fibres ont ete etudiees a la fois 

 au niveau des ganglions et des connectifs, sur coupes 

 transversales et longitudinales. La fixation a ete effectu- 

 tuee par une solution de tetroxyde d'osmium a 1 %, 

 tamponnee au pH 7,3-7,5 selon Palade (I). Une fois mise 

 a decouvert par une dissection prealable, sur des animaux 

 maintenus en extension, la chaine ventrale a ete d'abord 

 fixee /'/; sitn, puis une portion de cette chaine, detachee 

 de Tanimal, a ete placee secondairement dans le fixateur 

 pour une duree de 2 a 3 heures en general, mais aussi 

 dans quelques cas pour des durees plus longues, atteig- 

 nant jusqu'a 24 heures. Les pieces ont ete enrobees au 

 methacrylate et coupees a Tultramicrotome Porter-Blum. 

 La plupart des observations ont ete faites sur un micro- 

 scope RCA du type EMU 3A et certaines d'entre elles sur 

 un microscope RCA du type EMU 3B. En vue de per- 

 mettre une comparaison directe des aspects neurofibril- 

 laires observes au microscope ordinaire et de ceux que 

 fournit le microscope electronique, des impregnations 

 metalliques ont ete executees sur les animaux des memes 

 lots en recourant aux methodes a I'argent reduit utilisees 

 par Cajal sur le meme materiel. 



Observations. — Sur une chaine ventrale les aspects 



que presente Taxoplasme des fibres nerveuses peuvent 



etre d'une fixation a Tautre ou meme d"un point a 



I'autre de la meme piece tres sensiblement differents. 



Nous n"envisagerons ici que les deux plus tranches 



d'entre eux. II est frequent de n'observer dans ces 



fibres, qu'elles soient de grand ou de petit diametre, 



aucune formation filamenteuse disposee longitudi- 



nalement et vraiment significative. Dans ce cas, en 



dehors des chondriosomes, generalement assez abon- 



dants, parfois tres allonges et orientes longitudinale- 

 ment, et de corpuscules arrondis de taille et de 

 densite variables, d'une interpretation actuellement 

 difficile, on ne trouve dans I'axoplasme qu'un reseau 

 grele et tres irregulier. Notons que De Robertis et 

 Bennett (2, 3) usant du meme fixateur sur la chaine 

 ventrale d'un autre annelide (Helodrilns caliginosa) a 

 souligne la particuliere pauvrete des cellules nerveuses 

 de cet animal en « neurofilaments ». 



L'autre aspect de Laxoplasme se rencontre beau- 

 coup plus rarement que le precedent dans les pieces 

 fixees normalement. Aux constituants de I'axoplasme 

 mentionnes dans le premier s'en ajoutent ici d'autres. 

 11 s'agit de nombreux filaments nettement orientes 

 longitudinalement, d'une longueur indefinie (il a 

 ete possible de les suivre individuellement sur des 

 distances superieures a 2 /n dans le cas de fibres 

 fixees en forte extension, ou les filaments deviennent 

 absolument rectilignes), d'un calibre uniforme d'en- 

 viron 200 A. Ces filaments, de forme cylindrique, se 

 montrent en general plus denses a leur peripheric 

 que dans leur region axiale, mais il parait difficile 

 sur ce type de preparations de decider si cette diffe- 

 rence de densite traduit reellement une particularite 

 de leur constitution. Une coupe transversale prati- 

 quee dans une fibre nerveuse contenant ces filaments 

 montrc qu'ils peuvent etre distribues de maniere 

 assez uniforme dans toute I'etendue de I'axoplasme. 

 Cette distribution se trouve au contraire complete- 

 ment bouleversee dans d'autres fibres par I'appari- 

 tion d'une ou plusieurs formations allongees, rela- 

 tivement volumineuses, tres fortement osmioreduc- 

 trices, disposees parallelement a I'axe des fibres et 

 auxquelles les filaments voisins paraissent s'agreger. 

 Le calibre de ces formations varie de I'une a l'autre, 

 mais reste en general de I'ordre du dixieme de micron. 

 Elles rappellent en tous points les neurofibrilles, telles 

 que les revelent chez la Sangsue les methodes argen- 

 tiques de Cajal, tres souvent reduites a une seule 

 dans le cas des petites fibres. 



Les filaments submicroscopiques dissemines dans 

 I'axoplasme que nous venons de decrire se ren- 

 contrent assez rarement dans les pieces de chaine ven- 

 trale de Sangsue fixees normalement. Leur apparition 

 s'accompagnant en general d'alterations plus ou 

 moins importantes d'autres structures, notamment 

 du chondriome, nous avons ete amene a y voir une 

 anomalie de la fixation et a varier systematiquement 

 les conditions de la fixation en vue de deceler la 

 cause de cette anomalie. Le fait qui nous parait pour 

 I'instant le plus propre a elucider ce probleme, c'est 



