Einfliifi von Temperatiir, Unterlagc ami Bedeck ung auf Praparate 



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obtenue par copie sur une emulsion a grand contraste 

 a Taide d'un temps de pose juste suffisant pour cn- 

 registrer les faibles lumieres du negatif. Les grandes 

 densites sent obtenues dc la meme fagon ma is en 

 travaillant sur un positif intcrmcdiaire. 



La tranche moyenne est obtenue apres confection 

 d'un masque des grandes lumieres du negatif que 

 Ton superpose a celui-ci et tirage sur emulsion dure 

 de I'image complexe ainsi obtenue. 



A partir de ces trois cliches on tire trois matrices 

 en gelatine qui sont impregnees des trois couleurs 

 fondamentales et dechargees successivement apres 

 reperage sur papier. 



On obtient ainsi une transposition en couleurs 

 des contrastes de I'image. Suivant I'ordred'impregna- 

 tion des trois matrices on peut obtenir six images 

 physiquement equivalentes mais donnant physiolo- 

 giquement a I'oeil de I'observateur une impression 

 fort differente. 



Seules deux images sont aisement interpretables, 

 I'une dans le cas des fortes densites de I'objet, I'autre 

 dans le cas des faibles densites. L'examen de ces 

 images montre immediatement que les contrastes ne 

 sont pas comme dans le cas du contraste de phase 

 proportionnels aux epaisseurs optiques de I'objet. 

 Les contrastes semblent parfaitement indepsndants 

 de I'epaisseur de I'objet et lies uniquement aux poids 

 atomiques des structures traversees. Pour en etre 

 certains nous avons effectue des microincinerations 

 par bombardement electronique dans le corps du 

 microscope lui-meme des fibres observees et pris des 

 images successives jusqu'au squelette mineral final. 



Ainsi on a pu mettre en evidence que les parties 

 de fibre dans lesquelles se trouvaient concentres les 



atonies de calcium etaicnt ceiies qui presentaient le 

 plus grand contraste et que ce contraste etait prati- 

 quement independant dc I'epaisseur dc la fibre ou 

 de ses details. 



Nous avons baptise ce phenomene nouveau du 

 nom de contraste interchromatique rappelant ainsi 

 que le contraste nait cntre des faisceaux d'electrons 

 ayant subi d'abord au niveau de I'objet puis au 

 niveau du diaphragme des pertes chromatiqucs ap- 

 proximativement equivalentes; le diaphragme objec- 

 tif etant suppose homogenc et I'objet hetcrogene les 

 pertes chromatiqucs subies a la traversce de I'objet 

 different statistiquement suivant les points de celui-ci 

 des pertes chromatiqucs moyennes en quelque sorte 

 compensatrices subies a la traversee du bord mince 

 du diaphragme. 



La compensation parfaite ne pourra se faire que 

 pour les quelques points de I'objet dont les poids 

 atomiques seront en principe egaux aux poids atomi- 

 ques des constituants du diaphragme. 



L'augmentation et la diflferenciation des contrastes 

 aura done pour origine la plus au moins grande 

 compensation des pertes chromatiqucs produites au 

 passage a travers le diaphragme. II en resulte un 

 contraste proportionnel aux poids atomiques des 

 structures traversees et pratiquement independant de 

 I'epaisseur de I'objet. 



Ceci n'est vrai en toute rigueur que pour une 

 ouverture du systeme optique electronique non finie. 

 Comme I'ouverture des objectifs est petite il faut 

 superposer a ce phenomene I'efTet de la diaphragma- 

 tion et les contrastes deviennent alors lies aux poids 

 molcculaires plus qu'aux poids atomiques de Tobjet. 



Der EinfluB von Temperatur, Unteiiage und 

 Bedeckung auf die Veninderung elektronenmikroskopischer Priiparate 



K.-J. Hanszen 



Physikalisch- Technische Buiidesaiistall, Biuuiischweig 



Jede optische Abbildung ist mit einem EingriflT der 

 abbildenden Strahlung in das untersuchte Objekt 

 verbunden. Je kleiner die abzubildende Einzelheit 

 um so groBer die Wirkung des EingrifTs auf sic. 

 Dieses grundlegende Gesetz laBt erkennen, wie sehr 

 das Problem der Objektschiiden im Elektronenmi- 

 kroskop mit wachsendcr VergroBerung an Tragweite 

 gewinnt, da die unverfiilschte Wiedergabe von Struk- 

 tureinzelheiten, die auf Grund des apparativerreich- 

 baren Auflosungsvermogens noch moglich sein sollte, 

 durch diese wesentlich behindert wcrden kann. 



Die primiire Folge der Wechselwirkung zwischen 

 den einfallenden Elektronen und dem Objekt beste- 

 hen in Anregung, lonisation und anderen quanten- 

 haften Veranderungen der getrofFenen Molckiile, die 



sekundiire Folge in einer pauschalen Erwiirmung des 

 ganzen Objckts. Durch vergleichende Hetrachtung 

 der im Elcktronenstrahl und der tei Temperaturbc- 

 handlung hervorgerufenen Veranderungen in organi- 

 schen Priiparaten konnten Konig und Mitarb. (5, 6) 

 die thermischen Schiiden von denjenigen trennen, die 

 auf spezifisch elektronische Wcciiscluirkungen zu- 

 riick/ufuhren sind. 



Ahcr auch die rein temperaturbedingten Schiiden 

 konnen im Elektronenmikroskop wesentlich andcrs 

 verlaufen als die thermischen Umvvandlungs\or- 

 giinge in iciiwn Substan/en (3, 4), da die Praparate 

 im Elcktronenstrahl einerseits mit der Triigerfolie, 

 andererseits mit den sicli auf ihnen niederschlagen- 

 den .,Kohle"-Bedeckungen reagieren konnen. Aus 



