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F. S. SJOSTRAND 



Geraden, sondern auf Kreisbogen bewegt, deren 

 Mittelpunkte D, und D., auf der .v- und .v-Achse liegen 

 und deren Radien r^ und i\_ groB sind gegeniiber der 

 Objektverschiebung. Bezeichnet man den kleinsten 

 Abstand des Objektes von der A-Achse mit .y und 

 den von der v-Achse mit }\ so gilt fiir die durch 

 Bewegung auf dem Kreisbogen erreichten Verschie- 

 bungsstrecken .v, und Vi wegen der groBen Krum- 

 mungsradien Xi^x und .Vi^.v. Die Zentrierung 

 wird durch Einstellung des Objektes auf den Schnitt- 

 punkt eines Fadenkreuzes der nachfolgend beschrie- 

 benen Optik erleichtert. 



Zentrierung und Anspitzen des Objektes werden 

 unter mikroskopischer Beobachtung vorgenommen. 

 Hierzu isteinBinokularmikroskop(ZeiB)mit40facher 

 VergroBerung schwenkbar um eine lotrecht stehende 

 Achse angeordnet, so daB sich in das Sichtfeld des 

 Mikroskopes nacheinander der Punkt Z und ein um 

 45 geneigter Spiegel bringen lassen (Abb. 2 oben). 



In der mit (I) bezeichneten Stellung (Abb. 2 unten) 

 befindet sich das Mikroskopobjektiv iaber dem Spie- 



gel und erlaubt somit eine Beobachtung des Plexiglas- 

 blockes in Richtung seiner Drehachse und damit die 

 Zentrierung des Objektes. In der Stellung (II) wird das 

 Objekt wahrend des Anspitzvorganges kontrolliert. 

 Die Beleuchtung des Objektes geschieht von unten 

 durch eine Bohrung im DrehpunktZdes Schwenkar- 

 mes und auBerdem von der Seite mittels einer 

 schwenkbaren Lichtquelle. 



Die Abb. 3 zeigt die technische Ausfiihrung des 

 Apparates. Die Grundplatte ist auf den StativfuB 

 eines Binokularmikroskopes der Fa. ZeiB aufge- 

 schraubt. Von links nach rechts sind folgende Teile 

 zu erkennen: Schwenkbare Lichtquelle, Schwenk- 

 arme des 45 -Spiegels, rechts davon Objekthalter 

 und vereinfachter Kreuztisch. Von den beiden Dreh- 

 knopfen am rechten Ende der Apparatur dient der 

 kleinere zur Vorschubeinstellung, der groBere zur 

 Drehung des Objektblockes. Abb. 4 zeigt einen 

 Plexiglasblock mit eingebettetem Objekt vor und 

 nach dem Anspitzen. 



An Improved Method to Prepare Formvar Nets for Mounting 

 Thin Sections for Electron Microscopy 



F. S. Sjostrand 



Laboratory for Biological Ultrastnicture Research, Department of Anatomy, 

 Karolinska Institiitet, Stockholm 



The mounting of microtome sections on formvar 

 nets instead of films means a drastic gain in image 

 contrast (1,2). The method to prepare metallized 

 formvar nets described in an earlier paper (2) is 

 time-consuming due to the difficulties in obtaining 

 reproducible results. The method to be described 

 means a considerable improvement as it makes it 

 possible to prepare formvar nets in a reproducible 

 way. 



The basic principle of the method to prepare form- 

 var nets is to introduce minute water droplets into 

 a thin layer of a formvar solution covering a glass 

 surface. The water and the ethylen dichloride used 

 as solvent for the formvar do not mix and, conse- 

 quently, a great number of air bubbles will appear in 

 the formvar layer when the ethylen dichloride and 

 water have evaporated. These air bubbles may under 

 certain conditions produce holes which perforate the 

 formvar layer completely. However, if the right con- 

 ditions are not fulfilled, the air bubbles will only 

 produce thinner regions in the formvar film but no 

 real holes. 



If the layer of formvar solution is very thin the 

 water droplets will produce holes in the formvar 

 layer and real formvar nets with large open area are 

 formed. A sufficiently thin layer of a formvar solution, 

 from which a mechanically stable enough formvar 



net is obtained, may be prepared in the following 

 way. A microscope slide is dipped into a 2 % formvar 

 solution with ethylen dichloride as solvent and 

 transferred to a small glass vessel, in which the air is 

 saturated with ethylen dichloride (fig. I). The satura- 

 tion can be achieved by covering the bottom, the 

 surfaces and the cover of the glass vessel with filter 

 paper wetted with ethylen dichloride. The micro- 

 scope slide is left in a vertical position in this glass 

 vessel for twenty minutes. This long time for draining 

 off" the formvar solution is necessary in order to 

 obtain a sufficient thin layer. The fairly high per- 

 centage of formvar secures a mechanically sufficiently 

 stable net. 



After twenty minutes, a stream of warm air satu- 

 rated with water vapour is blown into the glass 

 vessel and the microscope slide removed. A stream 

 of damp air may be obtained by blowing air at a 

 low pressure through warm water, the temperature 

 of which may be 50-80 C. Air at a pressure of 1-2 kg 

 is introduced at the bottom of a one liter or larger 

 Erlenmeyer bottle which for convenience may be 

 kept in a water bath at the desired temperature. The 

 moistened air is transferred to the above-mentioned 

 glass vessel by means of a short glass tubing. 



The microscope slide is removed from the glass 

 vessel, and after evaporation of ethylen chloride and 



