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A. KLEINSCHMIDT 



Abb. 5. Hammelerythrocyten, gespreitet. Deckglaspraparat, 

 mit Substrat und im B-Film iibertragen. Phasenkontrast. 

 1000 . 



Abb. 6. E. coli, gespreitet. GeiBelfarbung. Gerichtelc Aus- 

 breitung der GeiBeln im Albuminfilm. 2000 ■ . 



sobald sie zwischen die Filnibestandteile in die 

 Wasseroberflache treten. Dies ist zwischen 5 und 

 2 dyn/cm der Fall. Bei volliger Expansion sind alle 

 vorher im Mikroskop sichtbaren Hullen abgebaut 

 und zu kleinsten BruchstiJcken zerfallen. Bakterien 

 haben solche Erscheinungen nicht, sicher infolge 

 ihrer stabilen Zellwand. 



2. Fijr die elektronenmikroskopische Darstellung 

 ist die Ubertragung des auf Wasser liegenden 

 Films auf eine Formvarfolie wichtig. Die Methode 

 schlieBt sich an die Untersuchungen von Langmuir 

 u. Schaefer (14) an. Dabei laBt sich die Uber- 

 tragung durch einen geniigend hohen Schub des 

 Films liber 15 dyn cm erzielen, oder es geniigt 

 der anfiingliche Schub des B-Films bei Beginn der 

 Expansion. Bei vcrtikaler Stellung der freitragenden 

 Formvarfolie zieht der Film beim Fin- und Aus- 

 tauchen auf, bei horizontaler Stellung wird er von 

 der Oberfliiche abgehoben. Der Vorgang ist dann 

 einwandfrei, vvenn an der Folic keine Substratreste 

 wiihrend des Aufziehens haften. Die Methode iihnelt 

 in dieser Beziehung der Ubertragung von Fremd- 

 schichten auf Stearatstufenschichten nach Blodgett 

 u. Langmuir (2) und Sobotka (17), die ebenfalls zur 

 Dickenbestimmung solcher Filme und Protein- 

 schichten herangezogen wurden. Bei identischer Pra- 

 paration der zellhaltigen Schicht auf die Formvar- 

 folie und die Stearatstufenschichten ergaben sich 

 Schichtdicken von 20 bis 40 A. Sie stimmen mit den 

 aus der Albuminkonzentration errechneten Film- 

 dicken liberein. Dabei storen Anteile von Zellen bei 

 der Messung nicht, wenn nur keine zu hohe Kon- 

 zentration der Partikel gewiihlt wurde und spreit- 

 fiihiges Material aus den Zellen nicht austritt. Er- 

 forderlich fur eine richtige Ubertragung ist also im 

 wesentlichen ein geniigend hoher Schub. 



P 



Abb. 7. E. coli, gespreitet. Gruppe von flachen und erhabenen 

 Zellformen, letztere mit freiliegendem Teil der Zellwand. 

 Oben links stark iiberhohte GeiBelschatten, bedampft. 

 10000 . 



3. Zur mikroskopischen Beobachtung trocknen 

 die Objekte mit dem Film auf der Folic an. Die 

 dabei auftretende starke Abflachung der zuvor wal- 

 zenformigen Bakterien ist der Oberflachenspannung 

 des Wassers zuzuschreiben. Jedoch tritt keine wesent- 

 liche Umorientierung und lokale Storung im Film 

 ein. Die Gleichartigkeit vom Film auf Wasser und 

 der Schicht auf der Folic laBt sich auch einfach mit 

 Polystyrol-Latexteilchen, die in bestimmter Kon- 

 zentration im Albuminfilm gespreitet sind, uberprii- 

 fen. Die elektronenmikroskopische Darstellung gibt 

 fiir Bakterien und Erythrocyten einige besondere 

 Erscheinungen. 



Die gleichmiiBige Verteilung der Partikel, wie bei 

 Erythrocytenhiillen und Latex, trifft man bei Bakte- 

 rien nicht in dem MaBe an. Sie wandern gelegent- 

 lich vor der endgultigen Wasserabgabe kurze Strek- 

 ken aufeinander zu und bilden so kleine Gruppen. 

 Das ist davon abhiingig, wie rasch der Film aus 

 dem Wasser austaucht. Bei einzeln liegenden Bak- 

 terien zeigen die GeiBeln ijber groBe Strecken 

 eine Orientierung entsprechend dem Spreitungsvor- 

 gang (Abb. 6). Sowohl bei der Ubersicht wie im 

 Einzelbild ist die Ausbildung der GeiBeln hervor- 

 zuheben. Sie mussen schon vorher in der Oberfliiche 

 in gleichmiiBiger Form fixiert sein. Dann sind auch 

 die Zelleiber nicht mehr fahig, um eine horizontal 

 Achse zu rotieren. Nun treten bei E. coli ']q nach dem 

 pH-Wert des Substrats, bei dem gespreitet wird, 

 entweder Bakterienformen mit Retraktion des cyto- 

 plasmatischen Inhalts — bei saurem Substrat — auf, 

 oder solche Formen. bei denen die Zellen von einem 

 gleichmaBig dichten Material erfiillt sind — bei 

 neutraler oder alkalischer Reaktion (Abb. 7). Solche 

 Phanomene trifft man auch dann an, wenn saure 



