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b) Milieux solides. Le moüt de raisin exactement neuträlise, 

 puis gelifiö (10 ^/o) est un excellent milieu de culture. II en est de 

 meme du pain humide sterilise. 



Les Mucorinees se developpent avec le maximum de luxuriance 

 dans le milieu suivant : 



Vin blanc 1 litre, chauffe ä feu nu pendant Y2 heure jusqu'ä 

 elimination complete de l'alcool. On remplace l'eau perdue dans l'eva- 

 poration en le ramenant au volume primitif. On neuträlise exactement, 

 on ajoute 10 7o de gelatine et Ton filtre. 



Je ne sais d'oü peut provenir la luxuriance de Vegetation dans 

 ce milieu. Je Tai attribuee d'abord ä la glycerine qui prend naissance 

 au cours de la fermentation du moüt; mais des experiences compa- 

 ratives faites avec du moüt glycerine ont montre que cela n'etait pas 

 le cas, 



La gelatine dans les milieux solides peut etre remplacee par 

 l'agar-agar 1 72 "/o. On a l'avantage que le milieu ne se liquefie pas. 

 Des essais comparatifs montrent cependant que les Mucorinees crois- 

 sent mieux sur les milieux gelatinises. 



Le vin prive d'alcool, liquide, ne convient pas, meme lorsqu'il 

 est neuträlise. 



Methodes de culture employees. 



Trois ou quatre jours apres leur inoculation dans le pain steri- 

 lis6, les Mucorinees se developpent et il s'agit de les isoler. La plu- 

 part du temps, il suffit de toucher un sporange ä l'aide d'un fil de pla- 

 tine flambe, et de le repiquer sur moüt gelatinise (10 7e) pour obte- 

 nir, quelques jours apres, une culture absolument pure. Cependant 

 cette methode ne convient pas dans tous les cas, un melange etant 

 toujours possible. II faut alors recourir aux methodes de dilution en 

 usage en bacteriologie. La meilleure methode de selection est celle 

 que preconise Hansen^) pour les levures. Elle consiste, apres dilution 

 convenable (qui ne doit pas etre trop forte) dans du moüt gelatinise 

 encore liquide, ä porter une goutte de la dilution sous le couvre-objet, 

 prealablement flambe, d'une chambre de Ranvier, puis ä rechercher 

 au microscope une spore qui sera l'initiale de la colonie. 



Schouten^) donne une methode plus precise encore, d'apres lui, 

 mais que je ne recommande pas, car les complications introduites sont 

 autant de risques d'infection. La meilleure preuve en est que la pre- 



*) Hansen. Comptes rendus des travaux du Laboratoire de Carlsberg. 

 2) Schonten. Zeitschrift für Mikroskopie, XXII, 1905. 



