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2." Entro vasi appositi ermeticamente chiusi e contenenti aria 

 di composizione nota, muniti di manometro, di termometro e di tubi di 

 presa d'aria, erano poste a vegetare piante appartenenti a diverse specie, 

 sia acquatiche che terrestri. Trascorso un periodo di tempo più o meno 

 lungo (1-3 mesi), veniva tolta ed analizzata una certa quantità d'aria. 

 Se dette piante, durante tale periodo di vegetazione, avessero assorbito 

 dell'azoto libero dall'aria confinata in cui vivevano, una semplice ana- 

 lisi volumetrica, fatta alla fine dell'esperienza, l'avrebbe dimostrato. 



Questo metodo, che ha tutti i vantaggi di un'analisi diretta, non 

 esclude però in generale che tale diminuzione dell'azoto dell'aria confi- 

 nata possa dipendere anche da microrganismi, poiché mentre è cosa pos- 

 sibile sterilizzare semi o piccole gemme e i substrati corrispondenti, è 

 pressoché impossibile l'ottener ciò con piante bene sviluppate, aventi 

 molte foglie e rami. In alcuni casi però noi analizzammo l'aria di culture 

 sterilizzate, perchè ottenute da poche gemme. Per es. per la Salvinia e 

 per la Lemna i cui corpi vegetativi non svelavano simbionti neppure 

 interni. 



3.° Diverse fanerogame vennero ottenute in cultura da semi nei 

 quali era stata fatta la ricerca quantitativa dell'azoto totale. 



Dopo la sterilizzazione ' essi venivano seminati in substrato nu- 

 tritizio sterile ed esente d'azoto. L'aria che circolava entro le cam- 

 pane veniva privata col solito metodo dell'azoto combinato. Le piantine 

 ottenute da questi semi venivano accuratamente pesate e analizzate. 

 La differenza tra l'azoto totale in esse contenuto e quello contenuto nei 

 semi, dava la quantità d'azoto tolto all'aria. 



4.° Semi sterilizzati, contenenti una quantità nota di azoto to- 

 tale, vennero posti a germinare in substrato nutritizio sterile, conte- 

 nente una quantità nota di sostanza azotata. L'aria che circolava nelle 

 campane era anche in questo caso privata dei composti azotati. 



' Per quanto qualche autore (Beunheim, Chein. Zeitg., 12, 1321-1888) abbia 

 constatato la presenza di bacteri nell'interno di semi di frumento, orzo, mais e 

 pisello, tuttavia la maggioranza dei bacteriologi è concorde nell'affermare che tali 

 germi debbono ritenersi provenienti dall'esterno, e dovuti ad uno stato anormale 

 del seme. Feksbach (Cenir. f. Bakter., 4, 713-1888), che fece ricerche su pomodori, 

 rape, barbabietole, patate; Buchner (2e(7seÀc. /". d. ges. Batiiceseìi, Monaco JS89, 

 21), che verificò le ricerche di Bernheim : Lehmanx (Miiìicheiìcr nieil. ìì'ochensclin'ff, 

 36, 100-1889), che sottopose ad esperimento 800 semi, ottenendo sole 6 colonie 

 di bacteri (0,75 "/„) che considera prodotte da contagio esternò; Kramer (Zo /ic//- 

 tfì-iologia, pag. 137), che esperimento con semi di mais, avena e pisello; sono 

 tutti concordi nel conoludei-e che i tessuti normali delle piante sono liberi da 

 bacteri, e che quando questi vi si trovano, ciò deve costantemente ritenersi come 

 uno stato patologico. 



