Bucholtz, Beiträge zur Kenntnis der Gattung Endogone Link. 1 53 



zum Zweck entwickelungsgeschichtlicher und cytologischer Unter- 

 suchungen besonders die Jugendstadien der von mir gefundenen 

 Hypogaeen in den üblichen Gemischen zu fixieren anfing, lenkte 

 ich mein Augenmerk auf diese entwickelungsgeschichtlich noch 

 unbekannte und viel umstrittene Gattung. Im Jahre 1907 am 

 23. August a. St. fand ich unter einer Anpflanzung von Abies 

 sihirica in Michailowskoje (Gouv. Moskau, Rußland) mehrere 

 Exemplare der E. lactiflua Berk. ,und zwar von sehr verschiedener 

 Größe. Die kleinsten hatten 0,4 cm im Durchmesser, die größten 

 erreichten ca. 2 cm. Die knolligen, aber kompakten Gebilde 

 gaben beim Anschneiden verhältnismäßig wenig Saft. 



Umständehalber konnte ich mit der mikroskopischen Unter- 

 suchung dieses und anderen Materiales erst im Jahre 1910 be- 

 ginnen. Das gleich nach dem Auffinden in dem starken Flemming- 

 schen Gemisch in üblicher Weise fixierte Material lag bis dahin in 

 75 % Alkohol ; darauf wurde es für eine Nacht in absoluten Alkohol 

 gebracht und im Laufe des nächstfolgenden Tages allmählich 

 durch Xylol- Alkohol in reines Xylol übertragen. Nach 24 Stunden 

 kam das Material in Xylol mit etwas aufgelöstem Paraffin und 

 nach weiteren 16 Stunden in Xylol-Paraffin bei 35" C, wiederum 

 nach 12 Stunden in Paraffin mit 45*^ Schmelzpunkt bei 52 ^ C, 

 und am folgenden Tage in 52 <^-Paraffin bei 65 •^ C. Am nächsten 

 Tage wurden die Objekte in 52°-Paraffin eingebettet. So ein- 

 gebettet lag das Material bis zur Anfertigung von Serienschnitten 

 im August 1910. Die Mikrotomschnitte wurden zu 3 — 10 jx an- 

 gefertigt und in übhcher Weise mit der Dreifarbenmischung 

 (Saffranin-Gentianaviolett-Orange) gefärbt und vermittelst Al- 

 kohol und Nelkenöl in Kanadabalsam eingebettet. In einigen 

 Fällen kam auch die Eisenhämatoxylinfärbung nach Heiden- 

 h a i n zur Anwendung. Der Erfolg war nicht schlecht, doch 

 ließ die erste Färbung die einzelnen Membranen noch besser 

 differenziert hervortreten. 



Gleichzeitig mit den Mikrotomschnitten wurden auch Zupf- 

 präparate angefertigt. Diese wurden aus dickeren Schnitten 

 des unfixierten Alkoholmaterials gewonnen, indem sie zuerst in 

 Kalilauge erwärmt und dann unter der Präparierlupe mit der Nadel 

 in kleine Stückchen zerzupft wurden, so daß einzelne Hyphen 

 und einzelne Organe bloßgelegt waren. Darauf ließen sich letztere 

 durch eine ammoniakalische Karminlösung, aber am besten durch 

 Kongorot schön färben. Kalilauge löst wahrscheinlich viele Fett- 

 substanzen auf, wodurch das Präparat durchscheinend wird. 

 Zu demselben Zweck mit Äther behandelte Präparate zeigten 

 keinen Vorzug, auch nicht in den Fällen, wo die durch Osmium- 

 säure geschwärzten Fettsubstanzen das Erkennen der Einzelheiten 

 nicht gestatteten. Die (stärkere) Fixierungsflüssigkeit nach 

 Flemming dringt sehr schwer in das Innere des Fruchtkörpers 

 ein, was daran zu erkennen war, daß hier eine Schwärzung aus- 

 blieb. An der Peripherie der Fruchtkörper war dagegen die 

 Schwärzung eine sehr intensive und sie ließ sich auch nicht durch 

 Wasserstoff hyperoxyd entfernen. Gerade an der Grenze der 



