Ueber die Methoden zur Nach-weisung der Plasmaverbindungen. 175 



Wir fügen jetzt seitlich Schwefelsäure zu und beobachten. Es 

 tritt eine geringe Dunklerfärbung des Präparates, vorzüglich der Proto- 

 plasten ein, keine oder sehr geringe Quellung. 



Wir setzen nun weiter an den Rand des Deckglases einen halben 

 Tropfen der Pyoktaninlösung und beobachten dessen Vordringen unter 

 das Deckglas. Wo der Tropfen die Schwefelsäure berührt, färbt er 

 sich bräunlich gelb, und bald scheidet sich ein tröpfchenförmiger Nieder- 

 schlag aus. Dringt der Farbstoff langsam vor, so färbt sich der Schnitt 

 am Rande grünlich, und es tritt zugleich eine fast schwarze Färbung 

 des Protoplasmas und der Plasmaverbindungen au einzelnen Stellen 

 ein. Wir lassen den Farbstoff so noch 3 Minuten einwirken, ohne 

 dass der ganze Schnitt vom blauen Farbstoff bedeckt wird, und 

 tauchen dann den Objectträger mit Schnitt und Deckglas senkrecht in 

 eine Schale mit ungefähr 40Ü ccm Wasser so ein, dass die nicht vom 

 Farbstoff erreichte Partie des Schnittes nach oben gekehrt ist und auch 

 so vom coucentrirteo Farbstoff nicht erreicht wird. Wir spülen den 

 Schnitt schnell ab und legen ihn in Glycerin auf einen reinen Object- 

 träger. Vorher können wir ihn, wenn es nötliig ist, durch Abpinseln 

 von dem koruigen Niederschlag, der sich oft auf dem Schnitte bildet, 

 möglichst befreien. 



Ist die Färbung gut gelungen, so erscheint die Membran hellblau, 

 das Protoplasma schwarzblau, ebenso die Plasmaverbindungen. Die 

 Plasmavei bindungen haben ihre Form nicht geändert. 



Wir wollen nun sehen, wie die Reaction zu verstehen ist. 



Im Allgemeinen hat man wohl angenommen, dass das Jodjodkalium 

 bei allen diesen Anilinfarbstoffmeihoden nur die Rolle eines Fixirungs- 

 mittels spiele. Es geht dieses z. ß. aus ZlJIMERMANN's Bemerkungen 

 (Zimmermann, S. 240) hervor: „Auch bei Anwendung von Schwefel- 

 säure wurden die Schnitte meist zuvor mit einer Jodjodkaliumlösung 

 fixirt." Ebenso sprechen Bemerkungen von KlENITZ (S. 8) dafür. In 

 der That aber wirken Jod und Schwefelsäure bei einer Reaction als 

 Beize, und die intensive Färbung ist die Folge eines auf und in der 

 Plasmaverbindung und in den Kanälen entstehenden Niederschlages 

 einer Jodverbindung. 



Es lassen sich bei dieser Methode deshalb auch nur ganz be- 

 stimmte Farbstoffe verwenden. Das Pyoktanin MeRCK's ist bekannter- 

 massen ein sehr reines Methylviolett (ein Chlorhydrat des Pentamethyl- 

 pararosanilins und des Hexamethylpararosanilins). Seine für uns wich- 

 tigsten Reactionen sind die folgenden: 



Metallisch grün glänzendes Pulver; in Wasser und Alkohol mit 

 violetter Farbe löslich. Auf Zusatz von Salzsäure wird die wässerige 

 Lösung erst grün, dann gelbbraun; Kalilauge giebt rothe Färbung 

 und rothen Niederschlag in der wässerigen Lösung. In concentrirter 

 Schwefelsäure löst sich der Farbstoff mit braungelber bis gelber 



