über Eientwicklung und ßofriiclitung bei Saprolegnia monoica. I47 



beschaffenden Ameiseneier benutze, die ich mit wenig Wasser über- 

 'giesse und nacii Sterilisierung- im Dampftopf in einem mit Watte- 

 stopfen verschlossenen Kölbchen zu beliebiger Verwendung auf- 

 bewahre. 



Die Lebendbeobachtung. 



Das lebende Material beobachtete ich in Petrischalen von 10 cm 

 Durchmesser, deren Deckel während der Beobachtung entfernt 

 wurde. Die Objekttische der besseren ZEISS'schen Mikroskopstative 

 sind hinreichend gross, um mit Schalen von dem angegebenen Durch- 

 messer operieren zu können. Eine Wasserimmersion leistete mir bei 

 der Lebendbeobachtung gute Dienste. 



Fixierung, Färbung, Einbettung. 



Unter allen Fixierungsmittelu hat sich Chromessigsäure in starker 

 Yerdünnung am besten bewährt (Chromsäure 0,5 pCt., Essigsäure 

 1 pCt. und schwächere Konzentrationen). Ich fixierte etwa 24 Stunden 

 direkt in der Petrischale, nachdem das Kulturwasser ganz oder zum 

 Teil mit einer Pipette entfernt war. Dann wurde mit oft ge- 

 wechseltem Wasser ausgewaschen (i — 2 Tage lang), das Material in 

 25prozentigen Alkohol übertragen und in Schleicher- und Schuli- 

 schen Schläuchen dialysiert, einen Tag lang gegen 95-prozentigen 

 Alkohol, einen zweiten gegen absoluten. Als Vorharz benutzte ich 

 Xylol. Übertragen wurde aus Alkohol absolutus in Xylol in drei 

 Stufen. Dem Xylol wurde Paraffin vom Schmelzpunkt 58° C. zugesetzt, 

 bei niederer Temperatur (etwa 35 — 40° C.) das Paraffin zur Lösung 

 gebracht und dann in gewöhnlicher Weise eingebettet. 



Die Schnittdicke betrug 5 /x. 



Die Färbung geschah 



1. nach dem FLEMMlNG'schen Dreifarbenverfahren (Saffranin- 

 Gentlanaviolett - Orange). Vorschrift: Saffranin (Saffranin, 

 spirituslöslich 0,1 g, Alkohol 95-prozentig, 25 ccm, Wasser 

 25 ccm, Anilinwasser [1 : 300] 5 ccm) 10 Minuten, Alkohol 

 95-proz. -j- Yao P^'t- Salzsäure, zweimal eintauchen, Gentiana- 

 violettlösung (Gentianaviolett 0,45 g, Wasser 60 ccm, Anilin- 

 wasser [1:300J 5 ccm) 8 Minuten, Wasser kurze Zeit, 

 Alkohol 95-prozentig -{- Vso P^*'- Salzsäure zweimal eintauchen, 

 Orange G (0,1-prozentige Lösung) 3 Minuten, Alkohol ab- 

 solutus kurze Zeit, Nelkenöl 15 — 30 Sekunden, Xylol, 

 Dammarlack. 



2. Nach der GRAJ^l'schen Methode (Gentianaviolett [Lösung wie 

 oben], Pjosin-Nelkenöl). 



3. Nach dem HEIDENHAIN'schen Verfahren. 



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