Aplianoiiiyces laevis de Bary. I. Entwicklung der Sexualorgane usw. 213 



nun an der Peripherir des Mycels ausgeschnitten und auf neuen 

 Nährboden gelebt. Von der so crlialtenen Kultur wird in ähnlicher 

 Weise neues Impfmaterial gewonnen und die Überimpfung so 

 lange w iiMlciluilt, his vollständig bakterienfreic Kulturen erhalten 

 worden sind. 



Das Mycel einer solchen lleinknltur konnte nun in destilliertem 

 "Wasser mit Laichkörnern weiter kultiviert werden. Dort ent- 

 wickelte es zunächst Zoosporen, und die angebotenen Laichkörner 

 wurden infiziert. "> oder (i Tage uaeli der Infizierung konnte man 

 schon auf den Laichkürncrn di(^ zahli'eichen Oogonien und Anther- 

 idien beobachten. 



Den ^•on mir auf die eben beschriebene Weise isolierten 

 Aphanomijces Uievis bewahre ich seit 1'/., Jahren in Kultur und bin 

 jederzeit in der Lage, mir frisches Untersuchungsmaterial zu be- 

 schaffen. Es möge hier nicht unerwähnt bleiben, daß ich als 

 Nährmaterial für dauernde Kulturen auch sterilisierte Ameiseneier 

 benutzte, zu welchem Zweck diese nach CLAUSSEN (08) wirklich 

 ausgezeichnet sind. Aber Ameiseneier enthalten meist reichlich 

 Chitinmassen, die das Schneiden mit dem Mikrotom hindern, da die 

 Schnitte zerreißen. Diesem Übelstande entgeht man, wenn man 

 als Substrat sterilisierte Laichkörner verwendet, die sich sehr gut 

 schneiden lassen. 



Fixierung. Als Fixierungsmittel benutzte ich Chrom- 

 €ssigsäure in starker Verdünnung (0,3 pCt. bis 0,7 pCt.) und. 

 schvvacho Chromosmiumessigsäure nacli FLEMMING (1 T. + 5 T. 

 Wasser). 



Die obenerwähnten auf Laichköruern gezüchteten und aus 

 einer Zoospore entstandenen (4 — lOtägigen) Kulturen fixierte ich etwa 

 6-^8 Stunden direkt in der PP7rRIschale, nachdem das Kulturwasser 

 zum Teil entfernt war. A'or der Fixierung waren die Kulturen 

 sorgfältig mit destilliertem Wasser ausgewaschen, um das ]\[aterial 

 von Bakterien, die während der Beobachtungen in der PETRIschale 

 eindringen könnten, frei zu machen. 



Das Aaswaschen des fixierten Materials wurde in Leitungs- 

 Avasser unter öfterem W^echsel ca, 24 Stunden lang vorgenommen. 

 Die Objekte wurden entweder nachdem Glyzerinverfahren (0 VERTON) 

 oder mittels SüHULZEschen Entwässerungso-efäßes in Alkohol über- 

 tragen. Die Entwässerung wurde nach 24 Stunden vollzogen. 



Bei der Überführung in Xylol ist besondere Vorsicht 

 anzuwenden, da selbst geringe Zusätze hiervon ein zuviel bedeuten 

 und sehr leicht Schrumpfungen hervorrufen; infolgedessen benutzte 

 ich folgende Vorrichtung. An den Rändern eines 2.5 mm langen 



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