Untersuchungen über die Physiologie denitrifizierender usw. (13) 



H,0 dest. 100 ccm 



Na,S,03 0,5 g 



KNO, 0,5 g 



NaHC03 0,1 g 



K,HPO, 0,02 g 



MgCL 0,01 g 



CaCl, Spur 



FegCl. Spur 



Die Kolben wurden mit einem durchbohrten "Gummistopfen 

 verschlossen. Durch die Öffnung wurde eine, nach unten gebogene 

 Glasröhre geführt, wie das für die Kultur von Gärungsorganismen 

 üblich ist. Nach dem Impfen wurde der Kolben und auch die 

 Glasröhre ganz mit Nährlösung gefüllt, und das freie Ende der 

 Glasröhre wurde in ein Gefäß mit Quecksilber getaucht. Die 

 Nährflüssigkeit stand also mit der Atmosphäre nicht in Ver- 

 bindung. 



Nach wenigen Tagen trat in den Kulturen im Wärmezimmer 

 bei einer Temperatur von 25 " Celsius eine lebhafte Gasentwicklung 

 ein. Die Nährlösung blieb zunächst ganz klar. Nach einiger 

 Zeit wurde die Gasentwicklung geringer, und die Nährlösung 

 zeigte scheinbar eine leichte Trübung, In Wirklichkeit war aber 

 die Lösung klar, die Wände des Kulturgefäßes dagegen waren 

 mit einer dünnen, schwach opalisierenden Bakterienhaut über- 

 zogen, die sich regelmäßig einige Tage, nachdem die Nährlösung 

 verbraucht war und damit die Gasentwicklung aufgehört hatte, 

 in größeren Stücken von dem Glase ablöste und an die Ober- 

 fläche stieg. 



Durch wiederholtes Überimpfen von dieser Bakterienhaut in 

 neue sterilisierte Kolben wurden Kulturen erhalten, in denen sich 

 fremde Bakterien oder andere Mikroorganismen kaum nachweisen 

 ließen. Reinkulturen ließen sich auf diesem Wege, wie voraus- 

 zusehen war, nicht erzielen. 



Die Herstellung von Reinkulturen aus diesen Rohkulturen 

 erwies sich als außerordentlich schwierig. Alle die mißglückten 

 Versuche anzuführen, halte ich für zwecklos. 



Die Reinkulturen wurden schließlich erhalten durch Aus- 

 streichen der Bakterienhaut auf Agarplatten, die mit der an- 

 gegebenen Nährlösung und l,5proz. gewässertem Agar hergestellt 

 waren. Die Bakterien kamen aber nur dann zur Entwicklung, 

 wenn die Platten sich in einer Atmosphäre von sehr geringem 

 Sauerstoff druck befanden. Die Bakterienkolonien waren im Agar 

 als schwach opalisierende Stellen zu erkennen. 



