Anaerobe Atmung der Samenpflanzen und rsolierun,<>- der Atmuii.i-scuzjmo. 123 



Gemenges von Alkohol und Äther, und zwar 400 ccm Alkohol und 

 20(Kw??^ Äther. Nach einem Augenblicke setzt man Äther im Über- 

 schusse zu, und die oberhalb des Niederschlages aus Alkohol und 

 Äther bestehende Flüssigkeit wird sofort aufgehebert. Nun wird 

 neuerdings Äther aufgegossen und sodann sofort die überstehende 

 Flüssigkeit abgehebert. 



Der ganze Vorgang bei Fällung des Pflanzensaftes muss rasch 

 vorgenommen werden, so dass Alkohol und Äther nur möglichst 

 kurze Zeit auf das Enzym einzuwirken vermögen und infolgedessen 

 seine Aktivität nicht abschwächen. Die Flüssio-keit über dem 

 Niederschlag wird deshalb rasch abgegossen oder abgehebert und 

 der so gewonnene, das gärungserregende Enzym enthaltende Nieder- 

 schlag sofort abfiltriert. Die Filtration lässt sich am schnellsten 

 mittels Leinwand bew^erkstelligen. Auf die sterile Leinwand wird 

 die erhaltene Masse aufgeschüttelt und auf diese Weise des noch 

 anhaftenden Alkohols und Äthers entledigt, dass man mit dem Filter 

 auf und ab gerichtete, hutsciienartigo Bewegungen ausführt. War 

 das das Enzym enthaltende Sediment (Rohenzym) gut ausgeschieden, 

 so ist die Filtration in einigen Minuten vollzogen. 



Das so filtrierte Kohenzyni wurde entweder im Vakuum oder 

 in sterilen, zu diesem Zwecke besonders arrano-ierten Kolben ae- 

 trocknet 



Diese Kolben waren w'ie fob-t zusammengestellt: In den Hals 

 jedes der Kolben war ein dreifach gebohrter Kautschukstöpsel ein- 

 gepasst. Durch die eine dieser Öffnungen ging eine ziemlich breite, 

 knieförmig gebogene Röhre, welche bis fast an den Boden des 

 Kolbens reichte und mit Watte oefüUt w^ar. Li die zweite Öffnuns' 

 des Stopfens war eine kurze, gerade Röhre gesteckt, die ebenfalls 

 mit Watte gefüllt war und knapp unter dem Stopfen mündete. Die 

 «Iritte Öffnung war mittels einer Glasstange verschlossen, welche, so- 

 bald die Kolben einer dreifachen fraktionierten Sterilisation unter- 

 worfen waren, durch ein Thermometer ersetzt wurde. Das Thermo- 

 meter wurde, bevor man es in den betreffenden Kolben eingelassen 

 hatte, gründlich mit einer Sublimatlösuug abgewaschen und dann 

 auf die Weise abgesengt, dass es in Alkohol getaucht und die sehr 

 schwache Alkoholschicht angezündet wurde. 



Sodann erfolgte die Wägung jedes der Kolben 



Unter Beobachtung aller Kautelen <j;e2;en die Livasion von 

 Mikroben wurde hierauf in die Kolben ein bestimmtes Quantum des 

 ausgesüssten Niederschlages eingetragen und dessen Trocknung 

 durchgeführt. Die Kolben mit dem Enzym wurden nämlich in 

 kupferne Trockenapparate getan, in welchen eine Temperatur von 

 etwa 36 — 38° C. erhalten und sterilisierte Luft in starkem Strome 

 in der Weise durchgetrieben w^orden ist, dass die kurze, unterhalb 



