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4. Bsim Anreicherungsversuch ist von einem hohen Nitratgehalt aus- 

 zugehen, irid fills (lies niclit geliiigt, ist derselbc jeweils zu erhohen. 



Bei fortgesetzter Kultiir in geschlosseiien Stopselflasclien gelingt aiicli 

 dies nicht immer. Eiiie kurze Luftung geniigt jedocli sclion, iim deii Pro- 

 zess wieder in Qang zu setzen iind weiter bei Luftabschlusz im Stande zu 

 erhalten. 



5. Von einer Zeliuloseart \A auf andere iiberzuimpfen. Gelingt das 

 nicht, dann wird zeilweise der Stôpsel der Flasche abgenommen, bis die 

 Denitrifikation gut in Gang ist. 



6. Impfmaterial, welches krâftig denitrifizierenden Kiilturen entnommen 

 wird, ist eineii oder mehrere Tage wiederliolt auszuwaschen. 



7. Oder es wird nicht ausgewaschen, dann aber nur eine sehr geringe 

 Q.iantitât Impfmaterial unmitteibar ausgestrichen. 



8. Beim Ausstreichen sind die angegriffenen Fasern sorgfâltig auf der 

 Piatte zu verreiben und zu verteilen mit Hilfe eines Drigalsky-Spatels ; es 

 wird Bouillon igar b^eniitzt, welcher in Schulen von ca 20 cm Durchmesser 

 ausgegossen ist. 



9. Das âusserst trâge Wachstum der kleinen Kolonien macht es not- 

 wendig, die Platten mindestens 4 bis 6 Tage bei Zimmertemperatur stehen 

 zu lassen, vor zum Ueberimpfen in Zellulose 0,1 KNO3 ubergegangen wird. 

 Kommen jedoch wenig schnellwachsende Kolonien zur Entwicklung dann 

 ist das Wachstum etwas besser und nach drei Tagen mit unbewaffnetem Auge 

 zu konstatieren Sind viele schnellwachsende Kolonien vorhandeii, so wird 

 der von ihnen eingenommene Teil der Piatte herausgeschniiteii, oder er 

 wird durch Herausschneiden eines schmalen Agarstreifen von den ûbrigen 

 Teilen isoliert. 



IV. Reinkultur der Mikroben der Zellulosedenitrifikation. 



Aus den Rohkulturen, die nach der im letzten Kapitel beschriebenen 

 Méthode erhalten wurden, waren allmâhlich eine grosse Zahl Reinkulturen 

 auf schiefem Agar zusammengebracht worden. Wurden dièse zusammen in 

 Zellulose 0,1 KNO3 geimpft, dann trat gewôhnlich schon innerhalb 24 

 Stunden eine krâftige Denitrifikation ein, und das Nitrat war in 5 bis 6 

 Tagen verschwunden. Es iag nun nahe, die verschiedenen Kulturen zu 

 kombinieren und zu untersuchen, welche Kombinationen in Zellulose 0,1 

 KNO3 Denitrifikation gaben. Wenn jedoch mit einer grossen Anzahl Kul- 

 turen gearbeitet werden muss, so wird damit die Zahl der môglichen Kom- 

 binationen so gross, dass es nicht mehr môglich ist, dièse Methodik prak- 

 tisch durchzufùhren. WohI bestand kein Zweifel daran, dass die Zahl der 

 erhaltenen Artenbedeutend hinter der Zahl der Kulturen zurûckstehen wurde. 

 Aber um daruber Sicherheit zu erhalten, wâre es nôtig gewesen, sâmmt- 

 liche vorhandenen Kulturen auf eine grosze Anzahl von Eigenschaften hin 

 zu untersuchen. eitie sehr umfangreiche Arbeit, die uberdies eine vielseitige 

 KonfroUe erfordert .am zuverlâssige ResuUate zu ergeben 



