743 



744 



Schliesslich muss ich hier noch den be- 

 kannten Umstand erwähnen , dass in humus- 

 reichem Boden überhaupt keine oder nur 

 sehr wenige Knöllchen entstehen. So fand 

 ich letzten Sommer in einem Beete auf rei- 

 chem Gartenboden, welches im Jahre 1885 mit 

 Grabenschlamm überdeckt war , bei den fol- 

 genden Arten beinahe j edes Individuum knöll- 

 chenfrei: ViciaNarbonensis, V. Pseudo-Cracca, 

 Lotus coniculatus, JErvum Ervilia, E. Le?is, 

 Medicago mediaund junge Exemplare von Ro- 

 binia Pseud-Acacia. Nur diejenigen Wurzel- 

 theile, welche die Humusschicht durchbohrt 

 hatten , trugen einzelne Knöllchen. — Diese 

 Erscheinung dürfte darauf beruhen 1 , dass der 

 Humusboden, worin Bacillus Radicicola all- 

 gemein genug vorkommt, um die Wurzeln zu 

 inficiren, Stoffe enthält, welche diese Bac- 

 terie ebenso stark anlocken , wie die Papili- 

 onaceenwurzeln und daher die Infection vor- 

 beugen. Die grosse Anziehung, welche aller- 

 lei in Wasser gestellte Pflanzentheile auf 

 Bacillus Radicicola ausüben veranlasst mich 

 zu dieser Annahme. 



Dass die Knöllchen an den Wurzeln von 

 in Nährlösung cultivirten Papilionaceen ge- 

 wöhnlich fehlen, beruht wohl auf den Um- 

 stand , dass solche Nährlösungen, wegenMan- 

 gel an gelösten organischen Substanzen das 

 Wachsthum von Bacillus Radicicola aus- 

 schliessen, oder nur in der unmittelbaren 

 Nachbarschaft der Wurzeln ermöglichen. 



5. Cultur des Bacillus Radicicola aus 

 den Knöllchen. 



Ehe ich zur Besprechung der bacteriolo- 

 gischen Eigenschaften der Knöllchen über- 

 gehe, einige Worte über die Culturbedin- 

 gungen, welche diese Untersuchung erfor- 

 dert. 



Ich schicke voraus, dstssBacillus Radicicola 

 Aerobie ist, obschon das Optimum der Sauer- 

 stoffspannung bei übrigens günstigen Ernäh- 

 rungsbedingungen etwas geringer sein dürfte, 

 wie die atmosphärische. Ich konnte daher 

 bei meinen Culturen das Koch 'sehe Plat- 

 tenverfahren anwenden. Meine Culturplatte 

 ist dabei der Boden einer Glasdose mit aufge- 

 schliffenem Deckel. Die Gelatine wird direct 

 in die Dose gegossen , entweder nachdem die 

 nach sorgsamer Sterilisation der Binde auf 

 gereinigten Glasplatten zerriebenen Knöll- 

 chen, oder Stücke davon, damit schon gemischt 

 sind, oder unvermischt, sodass das Unter- 

 suchungsmaterial in Wasser aufgeschüttelt 



über die erstarrte Gelatine ausgebreitet wer- 

 den kann , oder endlich, es werden auf die 

 Schicht der unvermischten Gelatine Impf- 

 striche von dem Inhalte der Knöllchen ge- 

 zogen. Da die schwächeren Vegetations- 

 Formen von Bacillus Radicicola innerhalb 

 der Gelatine sehr schlecht wachsen , ist die 

 Cultur auf der Oberfläche vorzuziehen; bei 

 sorgfältiger Versuchsanstellung geben die 

 Impfstriche am schnellsten gleichförmige Re- 

 sultate. Wenn man Bacillus Radicicola noch 

 nicht kennt, ist es nothwendig von den 

 Colonien auszugehen , wozu man am besten 

 die mit Alkohol gewaschenen und abge- 

 brannten Knöllchen in Wasser zerreibt und 

 vertheilt und letzteres dann auf die Platte aus- 

 giesst. Unter den zahllosen Radicicola-Co\o- 

 nien erkennt man bald die einzelnen Ver- 

 unreinigungen . 



Fleischwasserpeptongelatine ist für die 

 ersten Culturen des Wurzelbacillus zu con- 

 centrirt. Zwar findet darauf bisweilen Wachs- 

 thum statt, allein dieses ist so äusserst lang- 

 sam, dass dieser Nährboden verworfen wer- 

 den muss, wenn es sich nicht handelt um 

 Culturen, welche aufbewahrt werden sollen, 

 und auch dann noch ist diese Gelatine nur 

 für bestimmte Foraien und nach geeigneten 

 Vorversuchen anwendbar. Ein schnelles 

 Wachsthum der activen Formen findet nur 

 statt auf armen Nährböden, z. B. dem Absud 

 von Papilionaceenblättern mit 7 % Gelatine; 

 förderlich ist dabei jedoch i / 4 % Asparagin- 

 und wenn die Blätter zuckerarm sind, auch 

 x \i% Rohrzucker-Beigabe. 



Ich konnte nicht bemerken, dass der De- 

 co et der Nährpflanze gedeihlicher für die 

 aus der letzteren gewonnenen Bacterien ist, 

 wie derjenige aus anderen Papilionaceen- 

 arten und befand mich , mit allerlei er- 

 probten Mischungen , schliesslich am besten 

 bei Erbsenstengel- oder Fabastengeldecoct 

 mit 7 % Gelatine. Immer, aber beson- 

 ders bei Agarverwendung oder bei den Cul- 

 turen in Nährlösung ist y 4 % Asparagin, 

 wie gesagt nützlich. Die weniger activen 

 Formen, deren Vegetationskraft abgeschwächt 

 ist, lassen sich durch kräftige Ernährung 

 durchaus nicht treiben '), — vielmehr werden 

 sie dadurch zurückgesetzt; besonders in 

 Nährlösung gestattet bei derartigen Culturen 



') Einige Male sah ich unter den Aussaaten ab- 

 geschwächter Formen durch späteren Asparaginzusatz 

 vereinzelte Colonien, wie aus der Lethargie erweckt, 

 I activ werden und schnell heranwachsen. 



