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auf Grund qualitativ verschiedener Reactio- 

 nen mit der nöthigen Sicherheit schliessen, 

 mit Stillschweigen übergangen hat und seine 

 Bemerkungen so vorbringt, als ob ich aus 

 dem Eintreten einer Reaction auf das Vor- 

 handensein von Eiweiss geschlossen hätte. 

 Dieser Umstand muss bei einer so kritisch 

 veranlagten Natur, wie es Klebs ist, eini- 

 germaassen Befremden erregen. — Mit dem 

 Satze, »mir genügt es nachgewiesen zu haben, 

 dass diese Rothfärbung nämlich mit Alloxan) 

 eine sehr verbreitete Erscheinung ist und es 

 daher keinen Werth hat, dieselbe als Erken- 

 nungsmittel für Eiweiss zu benutzen « kann 

 ich mich nicht einverstanden erklären. Ab- 

 gesehen davon , dass schon aus meinen Aus- 

 führungen 1 ) zur Genüge hervorgeht, dass noch 

 andere, als die mir bekannten Körper mit 

 Alloxan Rothfärbung geben dürften , habe 

 ich speciell mit den Worten geschlossen : 

 »Bei der Ausführung der Alloxanreaction auf 

 Eiweisskörper ist es gut , mit möglichst we- 

 nig Flüssigkeit zu arbeiten. Im Uebrigen ist 

 es unbedingt erforderlich , die angedeuteten 

 Vorsichten nicht ausser Acht zu lassen.« Die 

 empfohlenen Vorsichten sind in [den folgen- 

 den Sätzen ausgesprochen worden : »Bei der 

 Deutung einer mit Alloxan erhaltenen Roth- 

 färbung muss der Umstand in Betracht 

 gezogen werden, dass festes Alloxan , wie es 

 nach dem Verdunsten der Lösung an der 

 Luft zurückbleibt, binnen mehren Stunden, 

 allerdings schwache Rothfärbung annimmt, 

 besonders bei Anwesenheit von Ammoniak. 

 Um die übrigen ebenfalls mit Alloxan rea- 

 girenden Körper auszuschliessen , muss man 

 die betreffenden Präparate mit heissem Was- 

 ser auslaugen oder mit Wasser auskochen«. 

 Durch die Behandlung mit Wasser können 

 nun in der That die ausser Eiweiss reagiren- 

 den Körper — auch sämmtliche von Klebs 

 angegebenen — aus dem Präparate entfernt 

 werden. Allerdings deute ich die unter solchen 

 Cautelen erhaltene Rothfärbung — gemäss der 

 von mir angewandten Combinationsmethode 

 — erst dann auf das Vorhandensein von Ei- 

 weisskörpern , wenn auch — natürlich unter 

 den nöthigen Sicherungen — der Nachweis 

 der einfach hydroxylirten aromatischen 

 Gruppe erbracht ist. Ausserdem ist noch zu 

 beachten , dass auf Zusatz von Natronlauge 

 die Rothfärbung entweder sofort in Violett 

 umschlägt oder eine Zeit lang sich unverän- 



') Siehe meine Abhandlung S. 18, 25. 



dert erhält und dann ebenfalls in Violett 

 umschlägt. Das letztere Verhalten macht sich 

 geltend, wenn die Eiweissreaction einge- 

 treten ist. Dieser temporäre Unterschied 

 bezüglich des Eintretens der Violettfärbung 

 genügt hinlänglich , um die Natronlauge als 

 C'ontrollreagens anzuwenden. Meinen Hin- 

 weis darauf, dass es bei Ausführung der 

 Alloxanreaction gut sei, mit möglichst wenig 

 Flüssigkeit zu arbeiten, hat Klebs vollstän- 

 dig missverstanden und hat mir infolgedessen 

 Mancherlei insinuirt. Nun, soviel ist sicher, 

 dass Klebs die Rothfärbungen, welche ge- 

 wisse organische und unorganische Körper, 

 mit dem Alloxan zusammengebracht , an- 

 nehmen, alle unter einen Hut gebracht hat. 

 Das ist entschieden unrichtig. Man muss da 

 strenge die rothe Farbenreaction der organi- 

 schen Körper von der der unorganischen 

 scheiden. Alle organischen Körper, von 

 welchen derzeit bekannt ist, dass sie mit 

 Alloxan eine rothe Farbenreaction geben, 

 haben im Molecül eine Atomgruppe gemein- 

 sam, welche gewöhnlich CH (NHV.C0 2 H ge- 

 schrieben wird '). Das Eintreten einer Roth- 

 färbung beim Harnstoff ist nach meinem Da- 

 fürhalten nur auf durch die Darstellungsme- 

 thode erfolgte Verunreinigung (etwa durch 

 kohlensauren Baryt oder gar durch Ammoniak) 

 zurückzuführen. Die Rothfärbung . welche 

 Alloxan an der Luft erleiden kann, beruht 

 auf Ammoniakgehalt derselben und ist wohl 

 der Murexidreaction am ehesten zu verglei- 

 chen. Würde man mit Alloxan befeuchtete 

 Schnitte an der Luft trocknen lassen, so 

 könnte man demzufolge bei der Deutung 

 einer etwa eingetretenen Rothfärbung grober 

 Täuschung unterliegen. Ein solches Vor- 

 gehen wäre allerdings kritiklos. Um mit 

 Alloxan auf Eiweiss zu reagiren, gehe ich 

 folgendermaassen vor: Die mit Wasser aus- 

 gelaugten Schnitte werden auf dem Object- 

 träger in einige Tropfen Alloxanlösung ge- 

 bracht und das Deckgläschen daraufgelegt. 

 Vom Rande des Deckgläschens lässt man nun 

 nach Bedarf Alloxanlösung zufliessen, so dass 

 der Schnitt während der Beobachtung nicht 

 austrockne, sondern immer in einigen Tropfen 



!) In meiner Arbeit (1. c. S. 18j habe ich als wirk- 

 same Atomgruppe angegeben : CEU. CH (NH,). CO-,H. 

 Da auch das Glycocoll, wie Klebs zutreffend angiebt, 

 sich mit Alloxan roth färbt, und da diese Reaction nur 

 auf einen Atomcomplex des Glycocollmolekuls zurück- 

 geführt werden kann, so ist CH.,. CH (NE,), CO,H auf 

 CH NH 2 ). CO,H zu reduciren. 



