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üu gelatinisirendcn Mediun luid zwar verwendete; er, 

 da auch erneute Versuche wieder die Unbrauchbarkeit 

 von Gelatine und Agar zur Cultur von Nitrobacterien 

 gezeigt hatten, nunmehr einen anorganiselien, gelati- 

 nisirenden Körper, nämlieh Kieselsäure , die von 

 Kühne neuerdings als Cultursubstrat empfohlen 

 worden war. 



Der Verf. versetzt käufliches Wasserglas mit 3 Vol. 

 Wasser und rührt lUOccm dieses Gemisches in 50 ccm 

 verdünnte Salzsäure ein ; darauf wird das Gemisch 

 einen Tag in fliessendem, zwei Tage in oft erneuertem, 

 destillirtem Wasser dialysirt, bis Silbernitrat keine 

 Chlorreaction mehrgiebt, und die Flüssigkeit in Glas- 

 gefässen sterilisirt. Ausserdem werden von 



Ammoniumsulfat 0,4 Theile 

 Magnesiumsulfat 0,05 « 

 Kaliumphosphat 0,1 >> 

 Chlorcalcium Spur 



Natriumcarbonat ü,6 — 0,9 Theile 

 Wasser 100 Theile. 



abgewogen und die Sulfate mit dem Chlorcalcium 

 einerseits, der Rest andererseits getrennt sterilisirt 

 und nach dem Erkalten gemischt. 



Dann wird die erwähnte Kieselsäure in einem Glas- 

 kolben bis zur Hälfte eingedampft, 2 — li Tropfen 

 davon zur Probe auf ein Uhrglas gebracht und 

 1 Tropfen der Salzlösung zugesetzt. Wenn dieses Ge- 

 misch nach 5 Minuten zu gelatinisiren anfängt und 

 nach 10 — 15 Minuten so fest ist, dass ein Eindruck 

 auf der Oberfläche nicht mehr verschwindet, so bringt 

 Verf. behufs Herstellung von Culturen die einge- 

 dampfte Kieselsäure in Sehälchen von 5 ccm Durch- 

 messer und mischt die Salzlösung gut darunter und 

 zwar je nach dem gewünschten Grade der Festigkeit 

 des Cultursubstrates die Hälfte oder ein Drittel der 

 Salzlösung an Kieselsäure. Nach einigen Minuten 

 mus.s dann eintretende Opalescenz das Gelatinisiren 

 anzeigen. Das Aussaatmaterial vertheilt man vor dem 

 Mischen der beiden Flüssigkeiten in einer derselben 

 oder man macht nach dem Gelatinisiren Striche. 

 Zweckmässig ist es auch, bei Bereitung des genannten 

 Cultursubstrates statt Natriumcarbonat Magnesium- 

 carbonat zu nehmen, welches dann in der Umgebung 

 der Colonien aufgelöst wird und dadurch die Auffin- 

 dung derselben erleichtert. 



Die Nitrobacterien wachsen ihrer Natur nach auf 

 dem nach diesem Rccepte bereiteten Cultursubstrat 

 bei Weitem nicht so stark, wie gewöhnliche Bacterien 

 auf Gelatine ; ihre untergetauchten, isolirten Colo- 

 nien erscheinen als weisse Punkte, während längs der 

 Striche eine ziemlich dicke, weisse Kruste auftritt. Bei 

 schwacher Vergrösserung sind diese Colonien an 

 ihrem characteristischen Aussehen leicht wieder zu 



erkennen. Die Nitrobacterien lassen sich auf diesem 

 Substrat über zehn Wochen lebend aufbewahren. 



Dieser Nährboden ist für andere Bacterien zwar 

 sehr ungünstig, aber immerhin wachsen doch einige 

 darauf. Die Formen, welche neben den Nitrobacte- 

 rien in mit destillirtem Wasser hergestellten Mineral- 

 salzlösungen vorkommen, wachsen auf dem Kiesel- 

 säuresubstrat, wenn auch sehr schwach, entwickeln 

 sich früher als die Nitrobacterien und bilden weiss- 

 liche, sehr durchsichtige Flecke auf der Oberfläche, 

 die bald nicht mehr an Grösse zunehmen. Die Iso- 

 lirung der Nitrobacterien wird sehr erleichtert, wenn 

 man zuerst eine Mineralsalzlösung mit einer Spur 

 Erde inficirt und aus dieser Lösung dann das Kiesel- 

 säuresubstrat besäet. Es erscheinen dann nur ein- 

 heitliche Colonien, welche, wenn man sie heraussticht, 

 sich in Diphenylaminschwefelsäure mit einem tief- 

 blauen Hofe umgeben und sich so als Nitrobacterien 

 documentiren. 



Der Verf. hat jetzt verschiedene Formen von Nitro- 

 bacterien aus weit von einander entfernten Lokalitäten 

 untersucht und wird über diese demnächst genauer 

 berichten. 



Wie theilweise schon oben erwähnt wurde, bildet 

 sich in Reiuculturen von Nitronwnus sowohl in Mi- 

 neralsalzlösungen wie in sterilisirter Erde und auf 

 Kieselsäurenährboden fast nur salpetrige Säure und 

 nur Spuren von Salpetersäure, während doch im 

 Boden unter gewöhnlichen Verhältnissen sich Nitrate 

 bilden. Da Müntz neuerdings (Coraptes rendus 

 1891) die Ansicht vertrat, dass die salpetrige Säure 

 durch einen kräftigen Strom von Kohlensäure und 

 Sauerstoff im Boden in Salpetersäure verwandelt 

 würde und die betheiligten niederen Organismen 

 wohl überhaupt keine Salpetersäure, sondern nur sal- 

 petrige Säure bildeten, berichtet W in ogradsky 

 (Comptes rendus t. CXII, 1891, 13 juillet) über 

 seine Versuche, die diese Frage zu einem ganz ande- 

 ren Abschluss führen. Er stellte vergleichende, durch 

 ein Jahr laufende Versuchsreihen mit verschiedenen 

 Böden aus allen fünf Welttheilen an , mit denen 

 er eine schwefelsaures Ammon enthaltende Mineral- 

 salzlösung inficirte. In allen diesen mit Erde direct 

 inficirten Culturen trat zuerst salpetrige Säure in 

 schnell wachsender Menge auf, die aber, sobald das 

 Ammoniaksalz verbraucht war, vollständig weiter zu 

 Salpetersäure oxydirt wurde. Machte er aber nun 

 weiter von diesen successive Culturen, so hörte nach 

 einigen Generationen, besonders bei den untersuchten 

 europäischen Erden die Nitratbildung auf. In den Cul- 

 turen, die von vier der afrikanischen und zwei der 

 südamerikanischen Böden abstammten , erhielt sich 

 die Oxydation der Nitrite 8 Monate lang bis zur 8. 

 Generation auf der ursprünglichen Höhe, um dann 

 aufzuhören mit Ausnahme der ursprünglich mit Boden 



