E. G. Pringsheim, Kulturversuche mit chloropliyllführenden Mikroorganismen, III. 60 



Vielfach konnte man in der Kieselgallerte Kriechspuren erkennen, 

 ähnlich wie auf Agar. Die Erschwerung des Gleitens wurde aber 

 dadurch deutlich, daß die Oberfläche kleine dreieckige Einreißstellen 

 zeigte. Hier waren also die Fäden offenbar hängen geblieben und 

 hatten durch mechanischen Zug im Vorwärtsgleiten die geringe 

 Elastizität der Kieselgallerte zu stark beansprucht. 



Durch wiederholtes Überimpfen einzelner möglichst isolierter Fäden 

 unter stetiger mikroskopischer Kontrolle gelang es so, die Bakterien 

 allmählich zurückzudrängen, sodaß nur noch ab und zu ganz wenig 

 Bakterien bei der Überimpfung auf Agar mit organischer Stickstoffquelle 

 auftraten. Als solcher wurde hauptsächlich Heydenagar verwendet. 

 Dieser, der sich für Algen sehr bewährte, war nach dem für 

 Wasserbakterien empfohleneu Rezepte hergestellt, d. h. er erhielt 

 keine Zusätze als 0,2 — 0,8% Heydenuährstoff, der mit 1,5 — 2% Agar- 

 Agar in destilliertem Wasser im Autoklav gekocht wurde. Die Mischung 

 wurde durch einen Pfropf von entfetteter Watte gegossen und dann 

 durch Faltenfilter geklärt. 



Bald hatte ich die Freude, in den Petrischalen mit Heydenagar 

 bakterienfreie Fäden der erst in Angriff genommenen Oscillarienart 

 sich ausbreiten zu sehen. Die Anwesenheit von Spaltpilzen verriet 

 sich ja jetzt sofort durch deren üppiges Wachstum. Von den Heyden- 

 platten wurde in Schrägröhrchen mit dem gleichen Agar geimpft, 

 dann auch in Pepton-, Bouillon- usw. Nährlösungen. Die Kulturen 

 blieben rein. So war also das Ziel erreicht, freilich auf einem um- 

 ständlichen Wege: Rohkultur, Gipsblöcke, Salpeteragar, Kieselgallerte 

 und Heydenagar, also fünf Stufen. Ich überzeugte mich später, daß 

 es möglich ist, den Plattenguß mit Salpeteragar zu umgehen, doch 

 ist gerade dieser zur Isolierung und Auffindung der einzelnen Arten 

 sehr angenehm. Die Gipsblöcke sind natürlich nicht notwendig, wenn 

 man direkt auf Kieselgallerte impft. Es blieben dann nur drei 

 Stufen: Rohkultur, Kieselgel, Heydenagar. Letzterer läßt sich durch 

 Agarmischungen mit anderen organischen Nährstoffen ersetzen, wie 

 wir noch sehen werden; doch kaum mit Vorteil. 



Merkwürdig mag es wohl erscheinen, daß trotz der Benutzung 

 der Kieselgallerte wirkliche Reinkulturen erst auf Heydenagar erzielt 

 wurden. Die Ursache dafür liegt darin, daß zwar auf dem anor- 

 ganischen Gel alle äußerlich anhaftenden Bakterien abgestreift wurden, 

 einzelne in der Gallerthülle sitzende aber nicht erkannt werden konnten. 

 Die Weiterkulturen auf Heydenagar erlaubte dann die Auffindung und 

 Auslese der zufällig bakterienfreien Fäden. (Vgl. Anhang S. 89.) 



Ich bin mir darüber klar, daß dieser etwas komplizierte Gang 

 der angewandten Methode keine bequeme Handhabe für spätere Rein- 

 züchtungen bietet, wie sie etwa das bekannte Rezept zur Gewinnung 



