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Das oben erwähnte Stehenbleiben der Algenvermehrung und das Wiedereinsetzen 

 derselben nach dem Zusatz von Nitrat sprechen schon gegen eine Fixirung von freiem 

 Stickstoff durch den Crjstococcus, und die 15estimmung des Stickstoffgehaltes der einzelnen 

 Culturen am Schlüsse des Versuches bestätigten diese Vermuthung vollkommen. 



Diese Stickstoffbestimmungen wurden ausgeführt, nachdem die Versuche vier Monate 

 von Ende Juni bis Ende October an dem erwähnten Fenster gestanden hatten. Der Inhalt 

 jeder einzelnen Cultur wurde, sobald der Apparat zum Zweck der Analyse geöffnet wurde, 

 sogleich auf Reinheit geprüft. Zu dem Zwecke wurde der Inhalt direct mikroskopisch 

 untersucht und auch auf Gelatineplatten ausgesäet. Einigemal wurde zu diesem Zwecke 

 auch Kieselsäure mit entsprechender Nährlösung benutzt. Es wurde auch sofort ge- 

 prüft, ob die Algen in den einzelnen Culturen noch Nitrat oder Zucker unverwendet 

 gelassen hätten , es zeigte sich aber , dass diese beiden Körper überall von den Algen ver- 

 braucht waren. 



Die Culturen wurden in der Weise getrocknet, dass der Kolben im Sterilisations- 

 apparate in strömendem Dampf erhitzt wurde, während gleichzeitig ammoniakfreie Luft 

 hindurchgeleitet wurde. Rathsam ist es hierbei, den Sand und die Algen mit einem Glas- 

 stabe durch einander zu mischen, ehe die Cultur vollständig austrocknet, weil sonst der 

 Inhalt zu fest an den Boden antrocknet und dadurch Schwierigkeiten beim Ausleeren des 

 Kolbens entstehen. 



Der Stickstoff wurde nach Kjeldahl mit den Abänderungen, die nothwendig wer- 

 den, wenn in der Substanz Nitrate zugegen sind, bestimmt. Zur Reduction der Nitrate be- 

 nutzte ich nach Angabe von Förster') Salicylsäure und unterschwefligsaures Natron. Da die 

 vorhandene Menge von Nitrat nur gering sein konnte, nahm ich indessen weniger Salicyl- 

 säure als Förster vorschrieb. Ich benutzte für jede Analyse 10 cc Schwefelsäure mit 2% 

 Salicylsäure und 20 cc reine Schwefelsäure. Grosse Mengen von Salicylsäure würden die 

 Auflösung sehr verlängern, welche schon an und für sich recht langsam ging, weil in An- 

 betracht der grossen Sandmenge kräftiges Kochen wegen der Gefahr des Herausspritzens 

 der Substanz aus dem Kölbchen zu vermeiden war. Die titrirten Lösungen waren so ein- 

 gestellt, dass 1 cc von ihnen ungefähr 1 g Stickstoff entsprach; als Indicator diente Lakmoid. 



Der getrocknete Inhalt jedes Culturapparates wurde in zwei Hälften getheilt und 

 jede für sich mit Schwefelsäure oxydirt, nachdem der Culturkolben selbst mit der Oxy- 

 dationsschwefelsäure ausgespült worden war. Um Substanzverlust zu vermeiden, ist es 

 nöthig, bei der Aufschliessung anfänglich wie gewöhnhch das Kölbchen auf ganz kleiner 

 Flamme zu halten; dann, wenn das Schäumen vorüber ist, kann man die volle Flamme 

 anwenden, muss aber zuletzt, wenn die Schwefelsäure dunkelrothe Farbe annimmt, wieder 

 mit Vorsicht und nur auf einer Seite des Kölbchens erhitzen, weil sonst wegen der grossen 

 Menge des Sandes die Stösse zu stark werden und dabei die Kolben platzen oder Schwefel- 

 säure ausgeworfen wird. Es ist dagegen nicht anzurathen, das Aufschliessen des Inhalts 

 eines Culturkolbens in mehreren Kölbchen vorzunehmen, weil dabei die Versuchsfehler sich 

 vergrössern könnten. Nach vollzogener Aufschlicssung vereinigte ich den Iniialt beider 

 Kölbchen wieder, neutralisirte die Säure und destillirte das Ammoniak in die titrirte 

 Schwefelsäure, so dass der ganze Stickstoffgehalt einer Cultur auf einmal bestimmt wurde ; 

 die Resultate der Analysen sind in folgender Tabelle zusammengestellt: 



') Landwirthachaftlichc Versuchsstationen. Bd. 'A^. S. ItiS. 



