DE HISTORIA NATURAL l»l 



Las microfotografías representadas en la lámina i, las hemos obte- 

 nido de una nudosidad de trébol rojo, en planta muy joven arrancada 

 en el mes de Enero, y de intento hemos operado así, para presen- 

 tar las formas más sencillas de estas bacterias, de entre las cuales 

 hemos separado y conservado en cultivo puro la que por sus carac- 

 teres morfológicos nos ha parecido más interesante estudiar, al ob- 

 jeto de esta comunicación; en otra haremos el análisis bacterioló- 

 gico de la nudosidad, pues en nuestro concepto no es una sola espe- 

 cie ó raza de bacteria fijadora de nitrógeno lo que contiene la 

 nudosidad. 



El aislamiento de la bacteria de mayor longitud que aparece en la 

 lámina i, lo realizamos del modo siguiente: una raíz de trébol con- 

 teniendo algunas nudosidades, se lavó perfectamente con agua 

 y después se sumergió durante quince minutos en una disolución de 

 cloruro mercúrico al 1 por 1.000, con objeto de destruir todo ger- 

 men que viviera adherido á la superficie de la raíz; lavada después 

 la raíz repetidas veces con agua destilada y esterilizada, cortamos 

 y aplastamos dos ó tres de estas nudosidades, en una gota de agua 

 esterilizada colocada sobre un porta-objetos flameado, y tomando 

 una gota del líquido así obtenido, la diluímos en 10 c. c. de agua 

 esterilizada colocados en un frasco Hausen ó en un pequeño matraz 

 Pasteur; después de bien agitada esta diluición, mojamos en ella 

 un hilo de platino flameado, y sembramos en varios tubos de ensa- 

 yos, que contenían fundido y á temperatura menor de 40°, el medio 

 sólido de cultivo que utilizamos. 



Llevados estos tubos á la estufa á 22°, al cabo de cuarenta y 

 ocho horas ya aparecen colonias blanquecinas, redondeadas, gelati- 

 nosas, de aspecto anacarado, formadas muchas de ellas, según se 

 comprueba por la observación microscópica, por microrganismos que 

 presentan los caracteres morfológicos correspondientes al Bacillus 

 radicicola (Beijerinck); de estas colonias, sembramos en tubos ó en 

 frascos Pasteur, que contienen medios líquidos de cultivo, y en 

 éstos se reproducen perfectamente, obteniéndose así cultivo puro 

 del supuesto Bacillus radicicola, cuya identificación comprobamos 

 y con el que realizamos las investigaciones de que daremos cuenta. 

 El medio líquido de cultivo que empleamos es una infusión de 

 judías blancas secas, cuya cocción se continúa hasta que comienzan 

 á abrirse; se filtra el líquido y se añade 1 gr. de manita por cada 

 100 c. c; alcalinizado ligeramente este medio líquido por adición de 

 unas gotas de disolución de hidróxido sódico, se esteriliza al auto- 



