DE HISTORIA NATURAL 203 



Clostridium Pasteurianum. 



Los medios de cultivo líquido y sólido que preparamos para el 

 aislamiento de este microrganismo, son los mismos que utilizamos 

 para aislar y cultivar el Bacillus radicicola, ya citados en la co- 

 municación anterior. 



Tomamos la muestra de tierra á 10 cm. de profundidad, y medio 

 gramo de esta muestra, recién tomada, la diluímos en 25 c. c. de 

 agua esterilizada. Es detalle importante éste de hacer la dilución 

 de la muestra inmediatamente después de obtenida, porque la airea- 

 ción, la acción de la luz y la pérdida de humedad que supone con- 

 servar algunas horas la muestra al aire varía el número de gérme- 

 nes y aun determina el aniquilamiento de algunas especies. Una vez 

 hecha la dilución, se agita y se espera que sedimenten las partícu- 

 las terrosas, obteniéndose un líquido turbio que contiene en sus- 

 pensión la mayoría de los gérmenes que poseía la muestra de tierra 

 tomada. 



Para practicar la separación de estos gérmenes mojamos en el lí- 

 quido un hilo de platino, y así sembramos en varios tubos que con- 

 tienen fundido el medio sólido de cultivo. Con objeto de favorecer 

 el desarrollo de los microrganismos que viven en la tierra con vida 

 anaerobia, sembramos en unos tubos de ensayo que contenían el 

 medio sólido de cultivo, fundido, según la disposición aconsejada 

 por Kürsteiner (1), que permite hacer el cultivo de microbios en 

 vida anaerobia, sin que sea preciso disponer de material de labora- 

 torio especialmente construido para este objeto. 



Llevados los tubos á la estufa, á la temperatura de 20°, comienza 

 á observarse la formación de colonias transcurridas cuarenta y ocho 

 horas, y desde este momento es preciso seguir su desarrollo para 

 sembrar de algunas en medios líquidos. La práctica de estas opera- 

 ciones, así como la seguridad que ofrecen para la obtención de cul- 

 tivos puros, contiene una serie de detalles operatorios interesan- 

 tes, pero que no creemos necesario citar. Los tubos que contienen 

 los medios líquidos sembrados se llevan á la estufa, y pasadas vein- 

 ticuatro horas, algunos de ellos, y otros más tarde, comienzan á 

 enturbiarse, indicando el trabajo del microbio por la alteración del 

 líquido de cultivo. 



Viene ahora el estudio morfológico previo para el reconocimiento 

 de las especies aisladas y el escoger los que por el examen micros- 



(1) Centralblatt fur Bakteriologie, t. xix, pág. 99. 



