206 BOLETÍN DE LA REAL SOCIEDAD ESPAÑOLA 



mos que se cita como causa del fracaso de las primeras experiencias 

 que con este microrganismo realizó Winogradsky, el que en sus 

 condiciones normales de vida vive en simbiosis con dos Bacillus 

 designadoa a y [3; éstos facilitan y hacen posible el trabajo del Clos- 

 tridium, porque el gas carbónico que producen le protege del oxí- 

 geno, cuya acción, al decir de los que sobre este asunto han inves- 

 tigado, es perjudicial para su vida y para su función asimiladora del 

 nitrógeno atmosférico; claro está que operando como operamos con 

 cultivo puro, faltan las bacterias con las que el Clostridium vive en 

 simbiosis, y por ello está conforme con la idea expuesta el que 

 nuestro cultivo no absorba sensiblemente el nitrógeno atmosférico. 



Pero esta explicación no la encontramos suficientemente satisfac- 

 toria para la interpretación del resultado obtenido en nuestras expe- 

 riencias; no nos convence el que la presencia de las bacterias a y ¡3 

 ejerzan la influencia que se les atribuye sobre la vida y función bio- 

 lógica del Clostridium, pues ya hemos dicho que la vida aerobia de 

 este microrganismo es factible, y por lo tanto, el que pueda vivir 

 sin que el gas carbónico le proteja contra la acción del oxígeno, es, 

 según los resultados experimentales ya citados, perfectamente posi- 

 ble. En cuanto á lo que con la función asimiladora del nitrógeno 

 atmosférico se relaciona, pensamos si la no absorción del nitrógeno 

 sería debida á la falta en el medio líquido de cultivo, de alguno de 

 los llamados elementos catalíticos (véase primera comunicación) 

 que poseen las tierras y que en nuestro caldo de cultivo no existen; 

 orientados por esta consideración, y teniendo muy en cuenta la im- 

 portancia real que en la tierra de labor, como en todos los medios 

 de cultivo, tienen los llamados infinitamente pequeños químicos, 

 realizamos diversas experiencias, añadiendo al caldo de cultivo man- 

 ganeso-ión ó hierro en forma de disolución coloidal de hidróxido 

 férrico en cantidades bien determinadas. De las diversas experien- 

 cias realizadas sólo citaremos aquí una de cada grupo, pues esto 

 basta para la demostración de lo que en esta comunicación nos pro- 

 ponemos. En una próxima comunicación daremos á conocer mayor 

 número de experiencias. 



A 100 c. c. de nuestro caldo de cultivo, añadimos 1 c. c. de una 

 disolución de cloruro manganoso valorada, que por centímetro cú- 

 bico contiene 0,0005 gr. de Mn" y en el cultivo obtenido com- 

 probamos que al cabo de veinte días se había verificado una absor- 

 ción de nitrógeno atmosférico. He aquí los resultados del análisis: 



