SPERMATOGÉNÈSE DES BATRACIENS 19 



emploi du liquide de Benda, ce qui n'est pas favorable pour une vue 

 d'ensemble, bien que plus conforme à la réalité. 



Dans certains cas, les mitochondries sont parfaitement conservées 

 et colorables par exemple avec le rouge de Magdala ; les canaux de Holm- 

 grenn sont bien conservés (1). 



Toutes les colorations réussissent bien après cette fixation. Je ne 

 l'emploie malheureusement que depuis peu de temps, et la plupart de 

 mes pièces ont été recueillies à une époque où je ne m'en servais pas. 



Comme méthodes de coloration, je donne la préférence à l'héma- 

 toxyline au fer avec coloration de Prenant ou une de ses variantes. Il 

 est bon d'employer aussi comparativement l'hématoxyline au fer peu 

 différenciée, avec une couleur de fond claire comme l'orange ou le rouge 

 Congo. 



J'emploie plusieurs modifications de la méthode de Prenant, qui 

 donnent toutes des résultats très élégants, mais un peu différents. 



La méthode de Prenant type : éosine-hématoxyline au fer, vert 

 lumière, est celle qui colore le plus électivement et le plus sûrement le 

 tissu conjonctif. Le vert pâlit et disparaît souvent en peu de temps. 



On peut remplacer le vert lumière par le bleu de méthyle, la colora- 

 tion en est à peine plus stable. 



J'ai employé, après avoir fait une coloration à l'hématoxyline au fer 

 (fortement décolorée), les combinaisons suivantes : 

 Rouge Bordeaux (2) -vert lumière et vice versa. 

 Rouge Congo-vert lumière. 

 Rose de Magdala-rouge Congo. 



J'emploie tous ces colorants en solution aqueuse saturée. On colore 

 à fond avec le premier (vingt minutes à une demi-heure) ; on lave à l'eau, 

 et on colore avec le second un temps variable en surveillant de temps en 

 temps au microscope pour arrêter la différenciation au point où on désire. 

 Il n'y a pas, à proprement parler, d'élection ; le colorant employé 

 le second déplace le premier dans l'ordre suivant : conjonctif, mucus, 

 cuticules et brosses, puis en poussant un peu plus : corps chromatoïdes, 

 nucléoles (pyrénine), puis cytoplasme. Le suc nucléaire reste alors seul 

 coloré par le premier colorant. 



On obtient en employant le vert le premier et le Rouge Bordeaux 



(1) Holmgrenn indique d'ailleurs l'acide trichloracétique pour leur étude. 



(2) Il est important d'avoir un échantillon de rouge Bordeaux qui colore bien. Ceux qu'on trouve dans le 

 commerce sont très inégaux. 



