Studien über Entwicklung des Amphioxus. 11 



Bei Anfertigung der Schnitte selbst handelt es sich vor Allem darum, die 

 Embryonen in der Einbettungsmasse vollkommen genau in Bezug auf die Schnitt- 

 richtung zu orientiren. Der Embryo wird aus absolutem Alkohol auf einen Object- 

 träger gelegt und mit einem Tropfen Nelkenöl aufgehellt. Das Nelkenöl wird über 

 den ganzen Objectträger ausgebreitet, so dass der Embryo nur benetzt daliegt; 

 sodann werden vorsichtig einige Tropfen nicht zu stark erwärmter Wachs-Oel- 

 mischung auf den Embryo geschüttet. Man kehrt nun den Objectträger um und 

 sieht durch denselben den dunkeln Embryo von der weissen Wachsmasse sich 

 scharf abheben. Es ist leicht, durch Drehen der leicht verschiebbaren Wachsplatte 

 den Embryo mit der Längsrichtung des Objecttiägers parallel zu richten. Ich habe 

 dies stets unter der Loupe möglichst genau ausgeführt. Nun wird der Objectträger 

 wieder umgedreht und noch so viel Wachsölmischung zugeschüttet, dass man eine 

 den ganzen Objectträger bedeckende Platte erhält. Dieselbe wird, nachdem sie 

 erkaltet ist, von dem Objectträger abgeschoben, was immer ganz gut gelingt, wenn 

 derselbe mit Nelkenöl überall benetzt war. Es wird nun, wenn man will unter dem 

 Mikroskope, die Lage des Embryos genau geprüft, und wenn dieselbe mit der 

 Längsrichtung des Wachsstückes nicht vollkommen übereinstimmt, durch paralleles 

 Beschneiden desselben reparirt. Sodann führe ich genau zu beiden Seiten des 

 Embryos einen Nadelstich durch die Wachsplatte, um die Lage desselben zu 

 markiren. Hierauf wird zunächst auf den Embryo vorsichtig ein Tropfen wenig 

 erwärmter Wachsmasse aufgesetzt und nach Erstarren desselben die ganze früher 

 dem Objectträger zugekehrte Fläche mit Wachs übergössen. Um zu vermeiden, 

 dass die beiden Wachsplatten, zwischen welchen nun der Embryo liegt, wieder 

 auseinanderfallen, was manchmal zu geschehen pflegt, wird die Wachsmasse, natür- 

 lich nur in einiger Entfernung vom Embryo , mit einer heissen Nadel mehrfach 

 durchstochen 



Die Schnittserien wurden ohne Mikrotom aus freier Hand angefertigt, was 

 bei so kleinen Objecten bei einiger Uebung ganz leicht gelingt. Es wurde in 

 Alkohol geschnitten. Es ist beim Schneiden darauf zu achten, dass man die Stelle, 

 wo der Schnitt liegt, genau merke. Das betreffende Wachsstückchen wird mit einer 

 Nadel von dem flach auf den Objectträger gelegten Messer weggeschoben. Der 

 Schnitt wird nun mit einem Tropfen absoluten Alkohols behandelt, und nach Ent- 

 fernung des überflüssigen Alkohols wird ein Tropfen Nelkenöl zugesetzt. Dieses ist, 

 da es nur schwer verdunstet, und der Schnitt darin längere Zeit liegen bleiben 

 kann, anderen Mitteln vorzuziehen. Man kann zunächst die ganze Schnittserie in 

 Nelkenöl liegen lassen. 



Die Entfernung des Wachses geschieht nun dadurch, dass der Objectträger 

 über einer Weingeistlampe erwärmt wird. Das erwärmte Nelkenöl löst das Wachs 

 sehr rasch auf. Nach Entfernung des überflüssigen Nelkenöls (man kann den Schnitt 

 leicht mittelst einer Nadel aus dem erwärmten Nelkenöltropfen herausführen) wird 

 der Schnitt in Canadabalsam aufbewahrt. 



Die Laichung des Amphioxus .beginnt wohl in den ersten 

 warmen Frühlingstagen, nach meiner Beobachtung schon in den 

 letzten Tagen des März, und dauert wohl durch den ganzen 

 Sommer; doch ist sie, wie wir weiterhin auseinandersetzen werden, 

 von den Witterungsverhältnissen abhängig, so dass man im April 

 bei anhaltend schlechtem Wetter auch vierzehn Tage lang 



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