10 Dr. B. Hatschek: 



stets bei Behandlung einer grösseren Anzahl von Embryonen 

 einige Individuen nach der Osmiumsäure und nach der Carmin- 

 färbung probeweise unter dem Mikroskope zu prüfen. 



Bei der grossen Raschheit der Entwicklung ist es gut, sehr 

 viele Stadien zu conserviren. Ich habe in den frühen Stadien bis 

 zu dem Stadium des neunten Ursegmentes in sehr kurzen Zeit- 

 räumen, ja sogar jede halbe Stunde conservirt. Später genügt es 

 in grösseren Zeitintervallen zu conserviren , da sich de/ Embryo 

 selbst in mehreren Stunden nur unbedeutend verändert. 



Vom Stadium mit Mund und erster Kiemenspalte an wurden 

 die Embryonen nicht mehr in Gläsern gezüchtet, sondern pelagisch 

 gefischt. 



Ich will die Procednr, wie ich sie vorgenommen habe, hier etwas ausführ- 

 licher schildern. Mit einer kleinen Sangpipette werden die Embryonen, die in den 

 frühesten Stadien innerhalb der Eihülle auf dem Boden des Glases liegen, sobald 

 sie aber die Eihülle verlassen, in die Höhe steigen uud auf der dem Lichte abge- 

 wendeten Seite des Glases unmittelbar unter der Oberfläche des Wassers sich in 

 dichtem Schwärme ansammeln, in kleine Uhrschälchen übertragen. Man kann so in 

 einem kleinen Uhrschälchen voll Seewassers mehrere huudert Embiyonen beisammen 

 haben. Es werden nun in das Uhrschälchen einige Tropfen (ungefähr 10) einer 

 halbprocentigen Ueberosmiumsäuielösung zugesetzt. Die Menge derselben ist 

 erfahruugsgemäss zu modificiren, sowie auch die Daner der Einwirkung. Sodann, 

 wird der ganze Inhalt des Uhrschälchens rasch in ein kleines cylimirisckes Gläschen 

 geschüttet. Man lässt die Embryonen darin sich zu Boden setzen und schüttet das 

 Seewasser vorsichtig so weit als möglich ab. Sodann wird eine genügende Menge 

 Carmin zugeschüttet, so dass die Embryonen davon reichlich bedeckt sind. Die für 

 die Anfertigung von Schnitten bestimmten Embryonen wurden einer recht intensiven 

 Färbung unterzogen, wozu immerhin ungefähr 5 Minuten ausreichen. Die Aus- 

 waschung des Carmins wird in dem Gläschen selbst bewerkstelligt. Man schüttet 

 so viel Wasser zu, bis das Gläschen voll ist. Wenn die Embryonen zu Boden 

 gesunken sind, wird vorsichtig so viel wie möglich von der verdünnten Farb- 

 flüssigkeit weggeschüttet und diese Procednr mehrmals wiederholt, bis das Wasser 

 keine CarmiufärbuDg mehr zeigt. Dann wird allmälig zuerst schwacher, dann 

 stärkerer Alkohol zugesetzt, zuletzt auch dieser entfernt und die Embryonen in 

 absolutem Alkohol aufbewahrt. Die Nachwirkung der Ueberosmiumsäure macht sich 

 namentlich im Laufe der Zeit durch tieferes Nachdunkeln der Embryonen, manchmal 

 sogar etwas unangenehm bemerkbar.. 



Das Object wurde vor der Conservirung stets lebend untersucht, um das 

 Stadium genau zu bestimmen, und das Gläschen mit einer Nummer bezeichnet, da 

 an den dunkel gefärbten mit Reageutien behandelten Embryonen eine genaue Be- 

 stimmung des Stadiums nicht so leicht wie früher möglich ist. Zugleich wurde ein 

 Protokoll geführt, in welchem das Stadium, wie es durch Untersuchung des leben- 

 den Objectes festgestellt wurde, genau mit Beziehung auf die Nummer bezeichnet 

 wurde. Ich sammelte auf diese Art sehr vollständige Reihen zu Schnitten vor- 

 bereiteter Embryonen in ununterbrochener Aufeinanderfolge. 



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