SECTION IV. SPECTROGRAPHIE VISIBLE 



HISTOPHOTOMETRIE 

 (MICROPHOTOMÉTRIE. MICROSPECTROPHOTOMETRIE) 



DANS LE VISIBLE 



M. LOCQUIN 



Principe. Utilisation des données photométriques d*une image vue au 

 microscope pour étudier qualitativement et quantitativement la répartition 

 histologique ou cytologique de constituants cellulaires colorés naturelle- 

 ment ou artificiellement. 



Historique. De la microphotométrie globale, par réduction de la plage 

 sur laquelle porte la mesure, on passe à la microphotométrie ponctuelle, 

 a laquelle le nom de Lison reste rattaché comme étant le 1er réalisateur 

 d'un équipement de ce type. A partir de celle-ci divergent deux séries 

 d'équipements: les "Tomophotomètres" ou microphotomètres à balayage, 

 exploreint l'objet par tranches photométriques linéaires juxtaposées et 

 les "équidensitographes" explorant l'objet par tranches d'égales densités 

 superposées. 



Parallèlement une autre évolution se dessine qui va de la photométrie 

 en lumière blanche à la spectrophotométrie en passant par la microcolo- 

 rimétrie, toutes ces méthodes pouvant en principe être associées aux 

 précédentes. 



Limites. La limite absolue est la longueur d'onde de la lumière uti- 

 lisée dont dépend le pouvoir séparateur du microscope. En feiit, bien 

 d'autres facteurs limitants apparaissent, soit liés a l'objet: bruit de fond 

 structural, géométrie, diffraction — soit liés à l'optique: ouverture, — soit 

 liés à la chaîne détectrice, amplificatrice et traductrice généralement 

 électronique: bruit de fond instrumental, dérives... 



Instruments. Brève description des principaux instruments utilisés 

 pour: 



a) la photométrie globale microphotométrie directe 



■■ densitométrie avec intermédiaire photogra- 

 phique 



b) la photométrie ponctuelle Jsimple faisceau 



[double feiisceau 



c) la tomophotométrie 



d) 1' equidensitographie photographique 



e) l'equidensitographie électronique 



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