ETUDES HISTOCHÏMIQUES DE L'ACTIVITE 



PHOSPHORYLASIQUE. MISE EN ÉVIDENCE 



PAR L'ACTIVATION DE LA PHOSPHORYLASE KINASE 



S. GUHA et R. WEGMANN 

 Institut d'Histo chimie Médicale, Faculté de Médecine, Paris 



Une nouvelle méthode pour la mise en évidence de la phosphorylase dans 

 le foie et dans d'autres organes nous a permis d'étudier cette activité 

 dans les différentes conditions expérimentales. 



Cette méthode est basée sur l'activation de la phosphorylase-kinase, 



l'enzyme qui transforme la forme inactive de la phosphorylase en forme 



active, en présence de l'ATP et de Mg , et en même temps la phosphory- 



ase phosphatase (P R enzyme), enzyme inactivateur delà phosphorylase, 



est inhibée par le fluorure de sodium. 



Cette technique permet d'éliminer l'incertitude et l'irrégularité de 

 cette réaction dans quelques organes. 



Eji employant cette technique, l'activité phosphorylasique peut être 

 décelée dans le foie de toutes les espèces étudiées. D'ailleurs, cette 

 technique révèle l'existence de la phosphorylase-kinase dans d'autres 

 organes tels que le muscle strié, l'utérus, le myocarde, le cerveau, le 

 cartilage, la peau, le rein et la cornée. L'effet des fixateurs d enzymes 

 a été étudié sur les tissus en bloc, et sur les coupes fraiches. Dans les 

 coupes fraiches seulement, l'alcool et l'acétone conservent une activité 

 considérable. Toutes les variantes de formol détruisent cet enzyme. 



L'activation de la phosphorylase inactive par le 3-5-cy clique AMP 

 a été observée. La phosphorylase active est activée davantage par l'AMP. 



L'activation des différentes formes de phosphorylase par la protamine, 

 en présence et en l'absence d'AMP a fait l'objet de nos études. 



L'inhibition de la phosphorylase par le parachloromercurobenzoate 

 (PCMB) n'a pu être prouvée dans les conditions histochimiques. Mais la 

 participation du groupe -SH à l'action de la phosphorylase est prouvée 

 par l'étude de l'inhibition par l'acide monoiodacétique. 



Les expériences destinées à montrer les effets des agents réducteurs 

 ont fait l'objet d'une série d'essais importants. Les causes probables des 

 différences histochimiques avec les résultats obtenus par les études 

 biochimiques sont envisagées. 



Le rôle du "primer" joué pa- le glycogène endogène est également 

 envisagé. 



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