AUGMENTATION DE LA SYNTHESE DE 



L'HEMOGLOBINE IN VITRO PAR LES 

 RETICULOCYTES APRES IRRADIATION 



A. NizET et A. Herve 



Laboratoires de Clinique Medicale B (Prof. L. Brull), de Pathologic Generale (Prof. Z. M. 

 Bacq) et de Radiotherapie (Prof. P. Desaive) de I'Universite de Liege 



Les experiences que nous allons vous decrire ont pour but de mettre en 

 evidence I'influence de I'irradiation, soit de Torganisme tout entier, soit du 

 sang ou du plasma in vitro, sur la synthese de I'hemoglobine. Gette synthese 

 est mesuree a partir de I'incorporation du carbone radioactif de la glycine- 

 2-i''C et de la phenylalanine-2-^*C a rhemine et a la globine par les hematics 

 jeunes in vitro. 



L'un de nous (A. N.) a demontre, avec Robscheit-Robbins, que les 

 hematics jeunes anucleees ou reticulocytes ont besoin d'une serie d'acides 

 amines pour murir in vitro^^. Par ailleurs, une serie de travaux, bases sur 

 la methode des indicateurs isotopiques, ont demontre I'utilisation par ces 

 cellules de la glycine pour la synthese de I'hemine (London, Shemin, 

 Neuberger et coll.'' ^'^), de la glycine, de la leucine, de la lysine et de 

 I'histidine pour la synthese des proteines reticulocytaires (Borsook et coll.^), 

 et de la glycine et de la phenylalanine pour la synthese de la globine (Nizet 

 et Lambert^^"^''). 



La mesure comparative de I'incorporation d'anabolites radioactifs in vitro 

 permet une etude precise de la vitesse de synthese de I'hemoglobine dans 

 differentes conditions. 



techniques utilisees 



(a) Preparation des chiens 



Les animaux, adultes des deux sexes, sont soumis a deux saignees par 

 semaine (environ 20 cm^ par kg de poids), par ponction de la veine jugulaire 

 externe, jusqu'a ce que le taux d'hemoglobine soit abaisse jusqu'a 7 a 

 10 grammes pour cent. A ce moment, le taux de reticulocytes dans le sang 

 peripherique atteint 40 a 200 p. 1000. Les chiens regoivent une alimenta- 

 tion complete avec un supplement de fer et de vitamines. 



[b) Incubation du sang avec les amino-acides marques 



Les manipulations se font par voie aseptique. Le sang est additionne lors 

 du prelevement, et a raison de 1/10 de son volume, de la solution suivante : 

 heparine en poudre (Liquemine Roche) 20cg-glucose 2g-chlorure sodique 

 90cg-eau lOOcm^. Les amino-acides marques sont ajoutes au sang sous 

 forme de solution dans le chlorure sodique a 9 p. 1000. Les echantillons de 

 sang sont incubes pendant 5 a 10 heures a 37' C dans un bain thermostatique. 

 Apres incubation, le plasma est elimine et les hematics sont lavees 4 fois au 

 chlorure sodique 9 p. 1000, par centrifugations et decantations successives. 



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