Über die Kristallisation von Gärungsfermenten und ihre optischen Teste 69 



Grenzen vom Sauerstoffdruck unabhängig ist. Wie die Pasteurreaktion würde diese 

 Reaktion durch Kohlenoxyd und durch Blausäure gehemmt, weil die Konzen- 

 tration der Ferri-Oxygenase durch Kohlenoxyd und Blausäure vermindert wird. 

 Wie die Pasteurreaktion könnte diese Reaktion, ohne gleichzeitige Atmungs- 

 hemmung, durch Carbylamin gehemmt werden, wenn Carbylamin durch An- 

 lagerung an das Ferro-Eisen der Zymohexase die Ferro-Zymohexase vor der 

 Oxydation schützte. 



Trotzdem nun auf die angedeutete Weise vieles, was bisher chemisch unver- 

 ständlich war, erklärt werden könnte, so muß doch zunächst abgewartet werden, 

 wie das Problem der Muskel-Zymohexase gelöst werden wird. Denn ebenso wie in 

 Hefe gibt es im Muskel eine Pasteurreaktion und keine Erklärung kann befriedi- 

 gen, die die Pasteurreaktion nicht einheitlich, unabhängig von der Zellart erklärt. 



Wahrscheinlich wird man hier am schnellsten durch eine Untersuchung der 

 Hefe-Zymohexase zum Ziel kommen, also die negative Frage beiseite lassen, warum 

 die Muskel-Zymohexase durch Schwermetalle nicht aktiviert wird und statt dessen 

 die positivere Frage untersuchen, warum die Hefe-Zymohexase durch Schwer- 

 metalle aktiviert wird. Da Zink zu den aktivierenden Metallen gehört, kann die 

 Wirkung der Schwermetalle hier nicht wie in den sauerstoffübertragenden Fer- 

 menten auf einem Valenzwechsel beruhen. Offenbar liegt hier ein anderer Me- 

 chanismus biologischer Schwermetallwirkungen vor.* 



XIV. Kristallisation der Proteine der beiden dephosphorylierenden 

 Fermente 73 



Das Protein des ersten dephosphorylierenden Ferments ist unter meiner Leitung 

 von Th. Bücher mit Hilfe des Tests 4 aus Hefe isoliert und aus Ammonsulfat 

 unter Zusatz von Pyrophosphat kristallisiert worden. Die Methode der Isolierung 

 bestand im wesentlichen aus einer Fraktionierung der Zellproteine als Nukleo- 

 proteide mit Säure; neu war dabei, daß unter Zusatz von Alkohol fraktioniert 



wurde. 



Das Protein zeichnet sich vor andern Ferment-Proteinen der Gärung durch 

 seine große Wirksamkeit aus. Im optischen Test genügt eine Protein-Konzentra- 

 tion von 0,01 y pro cm 3 . Rechnen wir mit einem Molekulargewicht von 100000, so 

 beträgt die molare Wirksamkeit in der Richtung der Gärung bei 25° : 



Wmoiar = 320 000 [Mole Substrat / Mole Ferment Minuten]. 



Das Protein des zweiten dephosphorylierenden Ferments ist mit Hilfe des Tests 

 7 aus Hefe isoliert und aus Ammonsulfat kristallisiert worden. An Einzelheiten des 

 Isolierungsverfahrens, das Negelein ausgearbeitet hat, kann ich mich nicht mehr 

 erinnern. 



Die Proteine der beiden dephosphorylierenden Fermente sind streng spezifisch 



* Zusatz 1961. Inzwischen ist diese Schwermetallwirkung zweiter Art, wie wir 

 sie nennen wollen, sehr häufig in Fermenten gefunden worden, ohne daß eine Er- 

 klärung für den Mechanismus der Metallwirkungen gefunden worden wäre. 



