Über die Kristallisation von Gärungsfermenten und ihre optischen Teste 67 



1. Muskel-Zymohexase kann gegen die Komplexbildner Blausäure, Cystein und 

 Pyrophosphat ohne Wirkungsverlust dialysiert werden. 



2. Muskel-Zymohexase wird durch Zusatz von Komplexbildnern zur Test- 

 lösung nicht gehemmt. 



3. Muskel-Zymohexase, zweimal umkristallisiert, enthielt in 100 mg 2 y Kupfer, 

 2 y Zink und 1 y Eisen. 



Addieren wir die drei Metalle und rechnen die Metalle und das Ferment in 

 Mikromole um, so ergibt sich, daß 0,67 Mikromole Ferment etwa 0,08 Mikromole 

 Schwermetall, also keine stöchiometrischen Mengen Schwermetall enthalten. 



Die drei Ergebnisse ergänzen sich und scheinen zu beweisen, daß an der Wirkung 

 der Muskel-Zymohexase Schwermetalle nicht beteiligt sind. 



XII. Das Problem der Wirkungsgruppe 



Es ist bisher ein Ergebnis unsrer Untersuchungen über Fermente gewesen, daß 

 die Wirkung der Fermente auf chemischen Zwischenreaktionen beruht; und daß 

 die Ferment-Proteine keine Teilnehmer dieser chemischen Zwischenreaktionen 

 sind. 



Wenn zum Beispiel die Phenoloxydase Brenzkatechin zu Orthochinon oxydiert, 

 so wäre es möglich gewesen, daß das Ferment-Protein das Brenzkatechin oxydierte 

 und daß das reduzierte Ferment-Protein durch molekularen Sauerstoff reoxydiert 

 würde. In Wirklichkeit jedoch oxydiert Kupfer, an Protein gebunden, das Brenz- 

 katechin; und in Wirklichkeit wird Kupfer, an Protein gebunden, durch moleku- 

 laren Sauerstoff reoxydiert. Das entsprechende gilt für die rein organisch auf- 

 gebauten sauerstoffübertragenden Fermente, die gelben Fermente, sowie für die 

 sehr große Zahl der wasserstoffübertragendsn Fermente, die Pyridin-Proteide. 



Deshalb wird man, wenn man ein Ferment isoliert hat, nicht ruhen, bis man den 

 Nichtproteinteil gefunden hat : das „Koferment", wenn der Teil dissociierend ge- 

 bunden ist oder die „prosthetische Gruppe", wenn er fester gebunden ist. Erst 

 dann kann man hoffen, die Zwischenreaktionen, auf denen die Fermentwirkung be- 

 ruht, zu entdecken und damit die Fermentwirkung chemisch zu verstehen. 



Die Muskel-Zymohexase ist das erste Ferment gewesen, dessen Nichtprotein- 

 teil wir gesucht, aber nicht gefunden haben. Würden wir aber diesen Fall als Aus- 

 nahme hinnehmen, so würden wir sofort eine zweite noch bedenklichere Annahme 

 hinzufügen müssen: daß der Mechanismus der Zymohexasewirkung im Muskel 

 und in Hefe verschieden ist. Denn einen Nichtproteinteil der Hefe-Zymohexase 

 haben wir gefunden. Hefe-Zymohexase ist kein Protein, sondern ein dissociieren- 

 des Schwermetallproteid. 



XIII. Hefe-Zymohexase 5 



Hefe-Zymohexase wurde nach einer 1942 veröffentlichten Vorschrift vorgereinigt. 

 Zur weiteren Reinigung adsorbierten wir das Ferment bei pH 6,5 an Aluminium- 

 hydroxyd, eluierten das Aluminiumhydroxyd mit viel Wasser, wobei das Ferment 

 adsorbiert blieb und eluierten dann das Ferment mit m 50 Pyrophosphat bei pH 



