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Über die Kristallisation von Gärungsfermenten und ihre optischen Teste 



während offenbar in diesem Fall die Konzentration des Magnesiumsulfats durch 

 das Fluorid nicht vermindert werden konnte. 



Ein zweites merkwürdiges Ergebnis war es, daß wir gar keine Hemmung durch 

 Fluorid fanden, wenn wir den Phosphatpuffer durch Bikarbonatpuffer ersetzten. 

 Wurde aber Phosphat zu dem Bikarbonat hinzugefügt, so trat die Fluoridhemmung 

 wieder auf. Zum Beispiel fanden wir bei pH 7,34 in m/20 Bikarbonat : 



Mole/Liter 



Mole /Liter 



Mole/Liter 



CMg 



c Fluorid • 

 c Phosphat 



2,7 X 10" 3 





 1,0 10- 3 



1 

 keine Hemmung 



2,7 x lO- 3 



1,7 ■ lO- 3 







I 



Y 



keine Hemmung 



2,7 

 1,7 

 1,0 



10 3 



lO" 3 

 lO" 3 



71% Hemmung 



Aus derartigen Versuchen ergab sich, daß die Fluoridhemmung der Enolase 

 durch eine Substanz bewirkt wird, die Phosphat, Magnesium und Fluorid ent- 

 hält und zwar wahrscheinlich im Verhältnis 1:2:2; und daß dieses komplexe 

 Magnesiumsalz das Magnesium von der Enolase verdrängt, etwa: 



Magnesiumfluorophosphat Magnesiumenolase ^ Magnesiumfluorophospho-Enolase Ma- 



gnesiumsalz 



Indessen muß ich erwähnen, daß ich eine Erscheinung beobachtet habe, die 

 zu dieser Theorie nicht zu stimmen scheint. Bringt man Enolase-Protein in eine 

 Testlösung, die Phosphat, Magnesium und Fluorid enthält, so dauert es etwa 1 

 Minute, bis die Fluoridhemmung voll entwickelt ist; und bringt man das ge- 

 hemmte Ferment in eine fluorid freie Lösung zurück, so dauert es etwa 1 Minute 

 bis die Fluoridhemmung wieder völlig verschwunden ist. Eine gegenseitige Ver- 

 drängung von Salzen sollte nicht so lange Zeite beanspruchen. 



XI. Kristallisation der Muskel-Zymohexase 5 



Muskel-Zymohexase wurde mit Hilfe des Tests 1 isoliert und aus ammoniakali- 

 schem Ammonsulfat kristallisiert. 



Das Molekulargewicht fand Bücher mit der Streulichtmethode etwa 150000. 

 Bezogen auf diesen Wert, beträgt die molare Wirksamkeit des Ferments in der 

 Richtung der Gärung: 



W m oiar bei 20°: 2 000 Mole Hexosediphosphat / Mole Ferment :■; Minuten 

 Wmciar bei 38°: 11000 Mole Hexosediphosphat / Mole Ferment X Minuten 



Dies ist die kleinste molare Wirksamkeit eines Gärungsferments, die wir bisher 

 gefunden haben. Vielleicht hängt dies damit zusammen, daß die Zymohexase 

 Kohlenstoffverbindungen trennt, während die bisher isolierten Gärungsfermente 

 Phosphat übertragen oder Wasserstoff übertragen oder Wasser abspalten. 



Aus Gründen, die sich aus dem Folgenden ergeben werden, haben wir die Frage 

 der Beteiligung von Schwermetallen an der Wirkung der Muskel-Zymohexase 

 untersucht. Wir fanden: 



