Über die Kristallisation von Gärungsfermenten und ihre optischen Teste 65 



Cystein zusetzt. Dann entzieht das Cystein dem Quecksilbersalz sofort das Queck- 

 silber, und die Ferment-Wirkung setzt ohne nachweisbare Verzögerung ein. Es sei 

 darauf hingewiesen, daß Cystein und das Quecksilbersalz des Cysteins bei der 

 Wellenlänge des Enolase-Tests (240 m//) stark absorbieren; daß aber diese Ab- 

 sorption wegen der sehr kleinen Cysteinmengen, die zur Zerlegung der Queck- 

 silberverbindung notwendig sind, nicht stört. 



Schon bei unsern ersten Vorversuchen mit roher Enolase fanden wir, daß an der 

 Enolasewirkung eine dialysierbare Substanz beteiligt ist. Tatsächlich ist die aktive 

 Enolase ein dissociierendes Magnesium-Proteid, dessen Dissociationskonstante 

 bei 20° und pH 7,4 den Wert hat: 



Mole Mg 



Protein 



K = cjjg ■ = 0,6 • 10 J 



Proteid 



Liter 



Unter den gleichen äußeren Bedingungen ist die molare Wirksamkeit der Eno- 

 lase in der Richtung der Gärung, berechnet mit dem Molekulargewicht 68000 



W m oiar = 6800 Mole Substrat/Mole Ferment • Minuten. 



X. Fluoridhemmung der Enolase 



Seit Effront im Jahre 1890 entdeckte, daß Fluoride die Gärung hemmen, ist die 

 Fluoridhemmung viel diskutiert worden, zuletzt von Meyerhof und Lohmann, 

 die fanden, daß die Enolase besonders fluoridempfindlich ist und die daran die 

 richtige Vermutung knüpften, die Fluoridhemmung der Gärung beruhe auf der 

 Fluoridhemmung der Enolase. Niemand aber konnte den chemischen Mechanis- 

 mus der Fluoridhemmung erklären, ehe der Aktivator der Enolase gefunden war. 



Gehen wir bei unsern Erklärungsversuchen von dem physiologischen Aktivator 

 der Enolase, dem Magnesium aus, so liegt die Annahme nahe, daß Fluorid das 

 freie Magnesiumsalz der Lösungen zu Magnesiumfluorid binde und dadurch die 

 Dissociation des Ferments in inaktives Protein und Magnesiumsalz bewirke. 



Dann müßte um so mehr Fluorid zur Hemmung der Enolase notwendig sein, 

 je größer die Konzentration des Magnesiums wäre. Wir fanden das Gegenteil. 

 Zum Beispiel waren die Fluorid-Konzentrationen, die halbe Hemmung der Eno- 

 lase bewirkten, bei pH 6,74 in m/20 Phosphat: 



MgS0 4 

 [Mole/ Liter] 



1 x 10" 3 



2,7 • lO- 3 



27 ; 10-3 



Halbwerts-Konzentration 

 des Fluorids 

 [Mole/Liter] 



3,9 x 10" 4 

 2,0 x 10" 4 

 0,6 x 10- 4 



Es war also um so weniger Fluorid zur Hemmung der Enolase notwendig, je 

 höher die Konzentration des Magnesiums war. Waren 27 Millimole Magnesium- 

 sulfat im Liter Lösung, so hemmten 0,06 Millimole Fluorid die Enolase zur Hälfte, 



5 Warburg, Zellphysiologie 



