15 Über Gewinnung und Abbau des Cytohämins* 



Von Otto Warburg, Hans-Siegfried Gewitz und Wolfgang Völker 



Wir beschreiben im Folgenden die Gewinnung und Kristallisation des Cytohämins 1 aus Pferde- 

 herzen; seine Hydrierung mit Platin und Wasserstoff; seinen Abbau bei der Resorcinschmelze 2 

 zu Cyto-deutero-porphyrin sowie den Abbau des Cyto-deutero-porphyrins mit Chromsäure, 

 wobei Hämatinsäure und Methylmaleinimid entstehen. 



Nach Spektrum und Elementaranalyse war Cyto-deutero-porphyrin von Proto-deutero- 

 porphyrin nicht zu unterscheiden. Aus den Schmelzpunkten der Dimethylester jedoch ging hervor, 

 daß die beiden Porphyrine verschieden sind. 



Dieses Ergebnis ist inzwischen dadurch bestätigt worden, daß das Cyto-deutero-porphyrin 

 bei der Bromierung 3 Atome Brom aufnimmt, während Proto-deutero-porphyrin nur 2 Atome 

 Brom aufnimmt. Cyto-deutero-porphyrin scheint also 3 freie p'-Stellungen zu enthalten, was 

 K. Zeile auf Grund unsrer Analysen (private Mitteilung) bereits 1953 vermutet hatte. Herr 

 Zeile hat diese Arbeit ferner dadurch unterstützt, daß er 2 Pyrromethene für uns herstellte, 

 nämlich 4.5.5'-Trimethyl-pyrromethen und 4.5.5'-Trimethyl-4'-äthyl-pyrromethen, die zur Ge- 

 winnung von zwei neuen Deutero-porphyrinen dienten. 



Tabellen über die Schmelzpunkte einiger Deutero-porphyrin-dimethylester und ihrer Brom- 

 derivate findet man am Schluß dieser Arbeit. Die Tabellen enthalten die Schmelzpunkte von 

 4 neuen Deutero-porphyrinen, deren Synthesen in einer anderen Arbeit von Gewitz und Völker 

 beschrieben werden. 



I. Gewinnung des Cytohämins 



16 Pferdeherzen wurden von Fett und Begleitstoffen befreit, durch einen Fleisch- 

 wolf gedreht und mit viel kaltem Wasser gewaschen, bis das Waschwasser fast 

 farblos war. Der gewaschene Fleischbrei wurde zentrifugiert, um die Hauptmenge 

 Wasser zu entfernen. Gewicht etwa 35 kg. 



Rohprodukt . Aus je zwei kg wurden mit 6 / Aceton, dem vorher 48 ccm konz. Salzsäure vom spez. 

 Gewicht 1,19 zugesetzt wurden, durch 20 Min. langes Schütteln auf der Maschine die Hämine, 

 Bluthämin und Cytohämin, entzogen. Vom fast farblos gewordenen Fleisch wurde abzentrifugiert. 

 Die rotbraune Lösung der Hämine wurde nach Verdünnen mit 1 /io Volumen Wasser mit 4-». 

 NH3 bis pH 7 neutralisiert. Der ausgefallene Niederschlag, der die Hämine enthielt, wurde ab- 

 zentrifugiert und mehrmals mit 80proz. Aceton gewaschen und dann wiederholt mit salzsaurem 

 Aceton (40 ccm 2-n. Salzsäure auf 1 / Aceton) verrieben, bis nur noch wenig Hämin in Lösung ging. 

 Das Volumen des Acetonextraktes, der die Hämine enthielt, betrug 5 — 7 Liter. 



Die Lösung wurde mit 1 / 8 Volumen Wasser verdünnt und mit 2-». NH : j neutralisiert. Dem 

 ausgefallenen Niederschlag, der die Hämine enthielt, wurden nach Zentrifugieren und Waschen 

 mit 80proz. Aceton nochmals mit schwächer salzsaurem Aceton (40 ccm 1-». HCl auf 1 / Aceton) 

 die Hämine entzogen. Die jetzt dunkelbraune Lösung der Hämine (Volumen etwa 2 /) wurde unter 

 mäßigem Turbinieren auf 0° gekühlt und vorsichtig mit 1 — 1,2 / kaltem Wasser versetzt. Die dabei 

 ausfallenden weißen bis hellbraunen Verunreinigungen wurden abzentrifugiert. Aus der Lösung 

 wurde das Hämingemisch mit einigen ccm gesättigter Natriumacetatlösung gefällt. Es wurde ab- 

 zentrifugiert, mit Wasser, dann mit 80proz. Aceton gewaschen und getrocknet. 



Ausbeute: ca. 1,5 g Rohprodukt. 



Der Eisengehalt dieses Präparates betrug im Durchschnitt 5 Prozent. 



Hämochromogenspektrum 



Eine Probe wurde in 30-vol.-proz. Pyridin- Wasser gelöst und mit Hydrosulfit re- 

 duziert. Es erschien eine stärkere Bande (Protohämin) bei 557 mit und eine 



* Aus Zeitschrift für Naturforschung 10 b (1955): 541 



