226 Über das Verhalten von Ascites-Krebszellen zu Zymohexase 



war. Unsere Suspensionsflüssigkeit war also „inaktiviertes", ohne gerinnungs- 

 hemmende Mittel entnommenes Ascites-Serum. Es enthielt keine Zymohexase, 

 da es auf 57° erhitzt worden war, und es enthielt nur sehr wenig Zucker, da in der 

 Zeit zwischen Entnahme und Zentrifugieren fast der gesamte Zucker des Ascites- 

 Serums verbraucht worden war. Dagegen enthielt es viel Milchsäure, im Mittel 

 1 mg pro cm 3 . 



Zusatz von Zymohexase 



Bei anaeroben Versuchen ohne Zucker, bei denen Zymohexase nie von den Krebs- 

 zellen aufgenommen, sondern immer nur abgegeben wurde, war es nicht nötig, 

 dem inaktivierten Ascites-Serum Zymohexase zuzusetzen. Bei allen anderen Ver- 

 suchen jedoch mußte Zymohexase zugesetzt werden. Dies geschah in Form von 

 Muskelsaft. Frische Muskeln wurden mit der 3fachen Menge Wasser und mit 

 Sand zerrieben; der Saft wurde bei 12000 g klar zentrifugiert und dem inaktivierten 

 Ascites-Serum in solchen Mengen zugesetzt, daß 1 ccm 3 y Zymohexase enthielt, 

 eine Zymohexasemenge, die in etwa 0,005 ccm Muskelsaft enthalten ist. Die anderen 

 Fermente und Kofermente, die bei diesem Verfahren dem Ascites-Serum gleich- 

 zeitig mit der Zymohexase zugesetzt wurden, störten wegen der Spezifität des 

 Zymohexasetestes nicht. Durch Kontrollen überzeugten wir uns, daß die Zymo- 

 hexase in zellfreiem Ascites-Serum, nach Zusatz des Muskelsaftes, nicht wesent- 

 lich abnimmt, woran man mit Hinblick auf verdauende Fermente hätte denken 

 können (vgl. Tab. 2). 



Bestimmung der Zymohexase 



Die Zymohexase wurde optisch bestimmt 7 , nach Zusatz von Hexosediphosphat, 

 DPN, oxydierendem Gärungsferment und Arseniat eine Methode, die inzwi- 

 schen sehr allgemein angewandt worden ist. Dabei ist die optische Wirkung W* 

 definiert als die Zunahme des Logarithmus der Lichtschwächung bei der Wellen- 

 länge 340 m/i pro Stunde auf dem Lichtweg d für unverdünntes Serum, bei 38°. 



1 In — 



W* 



Stunden • d ■ v 



wo d der Lichtweg in cm ist und v das Serumvolumen pro cm 3 Testlösung. 



Enthält 1 cm 3 Serum 1 y Zymohexase, so ist bei pH 7,4 und 38° W* = 47. Man 

 erhält also die Konzentration der Zymohexase in y pro cm 3 , wenn man W* durch 

 47 dividiert. c = n7*/47. 



Da bei den optischen Messungen zu große Ausschläge nicht erwünscht sind, so 

 mußte das Serum für den Test sehr erheblich, z. B. auf das 50— lOOfache, verdünnt 

 werden, und auch dann genügten noch Ablesungszeiten von 5 Minuten. Durch die 

 Verdünnung wurde die Genauigkeit nicht beeinträchtigt, da es ja immer nur auf 

 die prozentische Änderung der lln to/i- Werte ankam. 



Zwei Modifikationen der früheren Vorschriften wurden vorgenommen. Erstens 

 wurde die Lichtschwächung nicht bei der Wellenlänge 340 mu, sondern bei 



