Ausbau der manometrischen Methoden 367 



erstens, daß das Dithionit, wenn es in der Birne durch CaCl-2 geschützt ist, trotz 

 erheblicher Wasserdampftension bei 20° keinen Sauerstoff verbraucht; zweitens, 

 daß das Dithionit trotz der sauren Reaktion von pH 3,8 den Sauerstoff schnell und 

 vollständig absorbiert. Ein Absorptionsmittel, das Sauerstoff nur bei alkalischer 

 Reaktion absorbieren würde, oder das schon vor der Benetzung Sauerstoff absor- 

 bieren würde, wäre für unsere Zwecke nicht brauchbar gewesen. 



Prüfung der Methode 



Zur Prüfung der Methode wurde in dem mit seinem Manometer verbundenen 

 Gefäß, dessen Gasraum 10 Vol.-",, CO-2-Argon, aber keinen Sauerstoff enthielt, 

 ein Sauerstoffdruck entwickelt und dann geprüft, ob dieser Sauerstoffdruck beim 

 Einkippen des Dithionits schnell und vollständig wieder verschwand. 



Zur Ausführung verwendeten wir kegelförmige Manometrie-Gefäße mit zwei 

 Birnen. Der Hauptraum enthielt eine Lösung von H2O2, die Birne I Katalase, die 

 Birne II Dithionit + Calciumchlorid. Zunächst wurde die Katalase in den Haupt - 

 räum gegeben und dadurch SauerstofTin den Gasraum entwickelt. Dann wurde das 

 Dithionit in den Hauptraum gegeben und dadurch der entwickelte Sauerstoff 

 wieder absorbiert. Der „Einkippdruck" der Salze Na>S20 4 + CaCli wurde in 

 jedem Fall mitbestimmt und zu dem negativen Druck addiert. Wir fanden in mm 

 Brodie : 



nach Zugabe der Katalase: -185 -187 -97,5 -185 +186, 



nach Zugabe des Na 2 S 2 4 : ~ 184,5 - 188 99 - 184,5 185,5, 



also eine sehr befriedigende Übereinstimmung zwischen entwickeltem und absor- 

 biertem Sauerstoff. 



Experimentelle Einzelheiten. Volumen des Gefäßes 20,91 ccm. Bei 20° Gefäßkonstante für Sauerstoff 

 ko 2 = 1,66 qmm. Hauptraum 3 ccm ;;//50 Phosphat pH 3,8 -- etwa 14 bis 28 Mikromole H2O2. 

 Birne I 50 y Katalase Boehringer. Birne II : 20 mg NaoS20 4 + 20 mg CaCl-2. Gasraum 10 Vol.-% 

 COo-Argon. Temperatur 20°. Nach Einkippen der Katalase zum Beispiel in 2' j 169 mm, in 3' 

 18 mm, in 5' mm; Summe : 187 mm. — Nach Einkippen des Dithionits: in 2' - - 146 mm, in 

 3' — 13 mm, in 5'- - 2 mm, in 5' mm; zusammen — 161 mm. Einkippdruck + 27 mm. Summe 

 — 188 mm. 



Anwendung der Methode 



Die Methode hat den Nachteil aller Differenzmethoden, daß sie um so ungenauer wird, je höher der 

 Druck des zu bestimmenden Gases ist; und daß sie, bei Benutzung der gebräuchlichen Apparatur 

 der biochemischen Manometrie, nur anwendbar ist bis zu Sauerstoffdrucken von etwa 300 mm 

 Wasser. Die Methode hat den weiteren Nachteil, daß bei der Oxydation des Dithionits 



NaoSo0 4 + 2 + H2O -> NaHS0 4 J NaHSOs 



schweflige Säure entsteht, deren Dampfdruck zwar bei pH 3,8 nicht stört, die aber aus Zellen 

 Kohlensäure austreibt, was bei Versuchen mit Chlorella berücksichtigt werden muß. 



Die Methode ist also in keiner Weise der 2-Gefäßmethode ebenbürtig, die wegen ihrer Ein- 

 fachheit, Sicherheit und Genauigkeit die Standard-Methode der biochemischen Manometrie 

 bleiben wird. Trotzdem wird die neue Methode in manchen Fällen, insbesondere bei der mano- 

 metrischen Untersuchung rein chemischer Reaktionen, sich von Nutzen erweisen. Es sei dazu 

 bemerkt, daß eine andere Methode, an die man hätte denken können, die manometrische Be- 

 stimmung des Sauerstoffs durch Verbrennung zugesetzten Wasserstoffs oder Kohlenoxyds, wegen 

 der Boudouard'schcn Reaktion nicht möglich ist, wenn Kohlensäure und Wasser zugegen sind. 



