402 Glutaminsäure in Chlorella 



säure von früheren Autoren irrtümlicherweise auf alkoholische Gärung zurückgeführt worden ist. 

 Tatsächlich ist die Gärung der Chlorella eine reine Milchsäuregärung. Merkwürdigerweise aber ist 

 diese Milchsäure nicht L-, sondern D-Milchsäure, wie in einer Arbeit mit Gewitz und Voelker ge- 

 zeigt werden wird. Was die Wirkung des Lichts in diesen Zellen anbetrifft, so ist sie mindestens 

 lOmal geringer als in den andern Zellen, offenbar als Folge einer Gegenreaktion der Zellen gegen 

 die Überbelichtung bei der Zucht. — Die x-Zellen sind als Versuchsmaterial nützlich, wenn man 

 die Glutaminsäure in Chlorella ohne Zusatz von Fluorid zersetzen will. Wegen der Milchsäure- 

 bildung wird in diesen Zellen anaerob, ohne Fluorid, Glutaminsäure zersetzt, aerob wird die 

 Glutaminsäure wieder aufgebaut. 



Versuchsmedien. Für die Versuche wurden die Zellen aus der Kulturlösung in einfachere Medien 

 übertragen, in die Salzlösungen S oder S*. 



Salzlösung S. 10 g MgS0 4 ■ 7 H 2 + 5 g KH2PO4 -4g NaCl 0,4 g NH 4 C1 2 / Wasser 

 0,6 cm 3 »-H2SO4 . pH 3,8. 



Salzlösung S*. 10 g MgS0 4 ■ 7 HjO + 5 g KH2PO4 + 2 / Wasser 0,6 cm 3 W-H2SO4 • pH 3,8. 



Salzlösungen 1 10 S oder 1/10 S*. Dies waren die Salzlösungen S oder S*, mit Wasser auf das 10- 

 fache verdünnt. 1 10 S* wurde vielfach für papierchromatographische Versuche verwendet, bei 

 denen ein höherer Salzgehalt stört. Dest. Wasser schädigt Chlorella und darf als Suspensionsmittel 

 bei biologischen Reaktionen nicht verwendet werden. Wurden die stärkeren Salzlösungen S und 

 S* bei papierchromatographischen Versuchen verwendet, so wurde nach Ablauf der biologischen 

 Reaktion zentrifugiert, die Salzlösung durch Wasser ersetzt, und 10 Min. auf 90° erhitzt und die 

 überstehende Lösung eingetrocknet. 



2. Glutaminsäure, manometrisch mit Zell-Trockenpulver 



Chlorella, suspendiert in dest. Wasser, wurde in gefrorenem Zustand getrocknet. 

 In dem Trockenpulver sind die Formen der Zellen erhalten, jedcch sind die Zellen 

 nicht mehr teilungsfähig und nicht mehr imstande, im Licht Kohlensäure zu 

 reduzieren. Das Trockenpulver, suspendiert in Wasser oder Salzlösungen, decar- 

 boxyliert L-Glutaminsäure, nach unsern bisherigen Erfahrungen keine andern 

 Aminosäuren, insbesondere nicht Asparaginsäure; und auch nicht Brenztrauben- 

 säure. Es eignet sich deshalb zur Bestimmung von L-Glutaminsäure in Zellextrak- 

 ten. Indem wir aus Zellextrakten mit Trockenpulver Kohlensäure entwickelten 

 und mit Hilfe dieser Tests die Substanz isolierten, aus denen die Kohlensäure 

 stammte, fanden wir, daß die Quelle der Kohlensäure Glutaminsäure ist. — Die 

 Suspension des Trockenpulvers in Wasser wird durch 10 3 -w. Blausäure inaktiviert, 

 durch Erwärmen auf 70° schnell unwirksam. 



Zur Bestimmung der Glutaminsäure brachten wir 20 mg Trockenpulver in die 

 Birne eines kegelförmigen Manometriegefäßes. Der Hauptraum enthielt 3 cm 3 

 der zu bestimmenden Lösung. pH nach Zugabe des Trockenpulvers war 5,0, die 

 Temperatur war 20°, der Gasraum enthielt Argon. Abb. 1 zeigt das Ergebnis eines 

 Versuchs, bei dem die zugesetzten 4,8 //Mole Glutaminsäure nach 50 Minuten zur 

 Hälfte zersetzt worden waren. 



Einer Erläuterung bedarf, warum ohne Zusatz von Glutaminsäure Kohlensäure 

 entwickelt wird. Diese Kohlensäure stammt aus der Glutaminsäure des Trocken- 

 pulvers. Die Glutaminsäure ist in dem Trockenpulver fest gebunden und kann 

 durch Wasser, sogar bei 100 () , nur schwer extrahiert werden. Die so bestimmte 

 Glutaminsäure betrug in 20 mg Trockenpulver 1 bis 1,5 //Mole. 



Beim Erhitzen frischer Zellen jedoch, die in Wasser oder Salzlösung suspendiert 

 sind, wird die Glutaminsäure extrahiert und kann in solchen Extrakten mit Chlo- 

 n?//<2-Trockenpulver bestimmt werden. Gibt man vor dem Erhitzen Fluorid zu den 



