43 Über das Verhalten einiger Aminosäuren in Chlorella 

 bei Zusatz von markierter Kohlensäure* 



Von Otto Warburg, Helmut Klotzsch und Günter Krippahl 



Die Entdeckung 1 , daß Glutaminsäure am Mechanismus der Kohlensäure-Assi- 

 milation in Chlorella als Katalysator beteiligt ist, veranlaßte uns zu untersuchen, 

 wie lange es dauert, bis bei Belichtung markierte Kohlensäure in denjenigen Ami- 

 nosäuren erscheint, die in größerer Menge im Hitzeextrakt von Chlorella vorkom- 

 men: Asparaginsäure, Glutaminsäure und Alanin (a + ß). 



In einem kegelförmigen Manometriegefäß, in dem sich 100 cm 3 Chlorella be- 

 fanden**, wurde mit Hilfe einer siamesischen Birne in Luft ein Druck von 150 mm 

 Wasser an Kohlensäure erzeugt, von der 50 mm 14 CO-2 war. Nachdem 5 Min. im 

 Dunkeln bei Zimmertemperatur bewegt worden war, wurde 0,5 oder 1,0 oder 5,0 

 Min. mit weißem Licht belichtet. Die absorbierte Lichtintensität war klein; in 

 5 Min. reagierte das Chlorophyll der Chlorella nur zweimal. Ein sonst gleich ge- 

 fülltes, aber nicht belichtetes Gefäß ergab das Verhalten der Chlorella im Dunkeln 

 gegen markierte Kohlensäure. 



Sofort nach dem Belichten des einen Gefäßes wurden beide Gefäße 5 Min. in 

 ein Wasserbad von 75° versenkt, um alle Fermentreaktionen zu hemmen. Dann 

 wurde zentrifugiert. Die überstehende Lösung, der „Hitzeextrakt", wurde einge- 

 trocknet, ein aliquoter Teil des Dunkel- und Heil-Extrakts wurde der zweidimen- 

 sionalen Papierchromatographie mit Phenol-Citrat-Phosphat und mit Butanol- 

 Propionsäure unterworfen. Die aus Tab. 1. ersichtlichen Impulszahlen pro Min. 

 wurden mit dem Geiger-Zähler in den Hitzeextrakten von je 10 mm 3 Chlorella ge- 

 funden. 



Das Ergebnis ist, daß bereits nach einer halben Min. schwacher Belichtung in 

 Asparaginsäure und Alanin mehr Aktivität gefunden wird als in den Phosphor- 

 säureestern. Was die absoluten Werte anbetrifft, so sei angegeben, daß 1 //Mol 

 unseres Kohlensäure-Präparates, eingetrocknet auf Papier, 1,7 Millionen Impulse 

 pro Min. ergab sowie daß die Mengen an Aminosäuren im Hitzeextrakt aus 10 mm 3 

 Chlorella von der Größenordnung waren : 



(//Mol) 



Asparaginsäure einige 1/100 

 Alanin einige 1/10 



Glutaminsäure zwei 1/10 



woraus man berechnen kann, daß in 1 //Mol Asparaginsäure sehr bald nach der 

 Belichtung 1 //Mol 14 CO-2 aufgenommen worden war. 



Die Aktivität der Glutaminsäure bleibt bei dieser Versuchsanordnung hinter 

 der Aktivität der Asparaginsäure und des Alanins zurück. Es ist möglich, daß in 

 Chlorella eine Kette von Aminosäuren katalytisch wirkt, in der die Glutaminsäure 



* Aus Zeitschrift für Naturforschung 12b (1957): 481. 

 ** Suspendiert in 0,05% MgSQ 4 ■ 7 H 2 Q + 0,025 % KH 2 P0 4 , mit H 2 S0 4 auf p H 3,8. 



