70 Weiterentwicklung der zellphysiologischen Methoden* 



Verbindung von Manometrie und optischer Milchsäurebestimmung 



Otto Warburg, Karlfried Gawehn und A. W. Geissler 



Wenn bei der Manometrie von Körperzellen Stoffwechselwerte wie zum Beispiel 



ßo 2 = — 5^ Q?co 2 =+5 



gefunden werden, so ist die aerobe Gärung = = 0, falls das y der Atmung = = 1 ist, 

 aber größer als 0, fall das y der Atmung numerisch kleiner als 1 ist. Da man nun 

 bei der Manometrie nur die gesamte Kohlensäure, aber nicht die Atmungskohlen- 

 säure erhält, so bleibt bei der Messung der aeroben Gärung eine Unsicherheit, die 

 bei den großen aeroben Gärungen der Krebszellen bedeutungslos ist, aber wesent- 

 lich werden kann, wenn kleine aerobe Gärungen zur Diskussion stehen. 



Um in solchen Fällen jede Unsicherheit zu eliminieren, verbinden wir die Mano- 

 metrie mit einer chemischen Milchsäurebestimmung, die alle andern Milchsäure- 

 bestimmungen an Spezifität übertrifft — der optischen Milchsäurebestimmung 

 durch die Umkehrung der Gärungsreaktion 



Brenztraubensäure + DPNH 2 — Milchsäure + DPN 

 Das Gleichgewicht dieser Gärungsreaktion 



Brenztraubensäure x DPNH-2 

 Milchsäure x DPN 



hängt vom pH-Wert ab und hat bei 20° folgende Werte : 



Hiernach liegt bei pH 7,4 das Gleichgewicht soweit zugunsten der Brenztrau- 

 bensäure-Reduktion — die die physiologische Gärungsreaktion ist — , daß man 

 die Rückreaktion, die Oxydation der Milchsäure, nicht zur Bestimmung der Milch- 

 säure benutzen kann. Bei pH 9,6 jedoch, wobei DPN nicht geschädigt wurde, ist 

 das Gleichgewicht bereits soweit zugunsten der Reaktion von rechts nach links 

 verschoben, daß man Milchsäure zur Hälfte oxydieren kann, wenn man das Ver- 

 hältnis DPNHo : DPN gleich 1 : 30 macht — wovon man sich durch Einsetzen in 

 die obige Gleichung des Gleichgewichts überzeuge. 



Die absoluten Milchsäurekonzentrationen bei der optischen Bestimmung sind 

 dann durch die Forderung gegeben, daß bei 340 mix auf dem Lichtweg 1 cm im 



*) Aus Hoppe-Seyler's Zeitschrift für physiologische Chemie, Bd. 320, S. 277-279, 1960. 

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