Hemmung der Phosphorylierung durch Phenanthrolin in lebender Chlorella 613 



säureamid zu Triosephosphat. Da Phenanthrolin die Wellenlänge 340 ma zu stark 

 absorbiert, mißt man den Ablauf der Reaktion bei 366 mu. 



Abb. 1 ist die graphische Darstellung eines Versuches, m 100 Phenanthrolin 

 hemmt die Phosphorylierung nicht, wenn man der Testlösung viel Magnesiumsalz 

 zusetzt, m 100 Phenanthrolin hemmt die Phosphorylierung sehr stark, wenn man 

 kein Magnesiumsalz zusetzt, sondern sich mit der katalytischen Wirkung der 

 kleinen Mengen an Magnesiumsalzen (oder Mangansalzen) begnügt, die die Test- 

 lösungen als Verunreinigung enthalten. Durch Zusatz einer größeren Menge 

 Magnesiumsalz zu dem gehemmten Fermentsystem kann man dann zeigen, daß 

 die Phenanthrolinhemmung der Phosphorylierung vollständig reversibel ist und 

 bedingt ist durch den Mangel an katalysierendem Metall. 



Reagenzien nach Böhringer Biochimica, Enzymatische Bestimmung von ATP. Temperatur 20°. 



Wellenlänge 366 m[x. 



„Minus Mg" bedeutet Böhringer-Reagenzien ohne Mg-Zusatz. Bei t wurden das oxydierende 

 und das phosphatübertragende Ferment zugegeben, bei t = 10 Minuten wurde die hemmende 

 Wirkung des n/100 Phenanthrolins durch Magnesiumzusatz vollständig aufgehoben. 



Anwendungen auf die Photosynthese 



1. Resynthese der Glutaminsäure. mlOOO Fluorid, zu einer Suspension lebender 

 Chlorella zugesetzt, bewirkt unter anaeroben Bedingungen, daß die Glutamin- 

 säure schnell zu y-Aminobuttersäure und Kohlensäure zerfällt; während aerob 

 der Zerfall der Glutaminsäure weitgehend durch die Resynthese der Glutamin- 

 säure kompensiert wird. 



Bei der Resynthese der Glutaminsäure steigt die Atmung der Chlorella auf das 

 Doppelte, m 100 Phenanthrolin hemmt diesen Anstieg der Atmung und gleich- 

 zeitig die Resynthese der Glutaminsäure vollständig 3 . Wenn nun hier, wie bei 

 der Phosphorylierung der Phosphoglycerinsäure, m/100 Phenanthrolin die Phos- 

 phorylierung hemmt, so versteht man, warum in m 100 Phenanthrolin die Atmungs- 

 steigerung durch Fluorid und damit die Resynthese der Glutaminsäure ausbleibt. 



2. Synthese der aeroben Kohlensäure. Wie die Resynthese der Glutaminsäure, 

 so kann man in lebender Chlorella auch die Synthese der aeroben Kohlensäure 

 durch m 100 Phenanthrolin vollständig hemmen. Zum Beispiel wurden 100 cmm 

 Chlorella, suspendiert in 3 ccm Salzlösung S pH 3,8 in den Hauptraum von 

 Manometriegefäßen gegeben, 30 Minuten mit 20 Vol.- ,, COi-Luft bei 20° im 

 Dunkeln geschüttelt, ohne Phenanthrolin oder in m 100 Phenanthrolin. Dann 

 wurde aus der Birne 0,2 m/5 Fluorid pH 3,8 zugegeben und dadurch die Kohlen- 

 säure entwickelt. Wir fanden: 



