Beobachtungen an Thymuskulturen in Vitro. 285 



zu erhalten, hat sich jedoch herausgestellt. Beim Kochen oder 

 Erhitzen im Autoclave zerteilt sich das Natriumbikarbonat, wobei 



Kohlensäure freigemacht, wird, und diese fällt das Kalciiunsal/.. 

 Auch die Methode, die Salzmischung trocken zu sterilisieren, er- 

 gibt eine Zerteihmg des Natriumbikarbonats in Natriumkarbonat 

 und Kohlensäure. Um die Lösung möglichst steril zu erhalten, 

 habe ich folgendes Verfahren angewandt. Der wärmefeste Kom- 

 ponent der Lösung ist durch Kochen für sich sterilisiert wurden. 

 Nach Abkühlung wurde eine bestimmte Menge einer in sterilem 

 Wasser zubereiteten konzentrierten Lösung von Bikarbonat oder 

 von dem trockenen Salz hinzugefügt. In letzterem Fall habe ich 

 das Salz oft vorher einige Zeit mit Schwefeläther behandelt, 

 der vor der Vermischung gänzlich verdunstet wurde. Das Er- 

 gehnis war befriedigend. 



Beim Zerschneiden des Thymus ist es wichtig, scharfe 

 Instrumente anzuwenden, so dass die mechanische Läsion auf 

 das möglichste beschränkt wird. Oft genug dürfte ein aus- 

 gebliebenes Wachstum gerade in zu starkem Zerreissen beim 

 Zerschneiden zu suchen sein. Aus demselben Grund dürfte 

 es auch verfehlt sein, die zu explantierenden Gewebsstücke so 

 klein wie möglich herzurichten. Bei jedem Einschnitt quillt 

 eine Menge frei gemachter Zellen, meist Lymphocyten, hervor, 

 ein Kennzeichen, dass man es mit dem richtigen Organ zu tun 

 hat. Bei älteren Froschlarven kann nämlich recht leicht eine 

 Verwechslung unter anderem mit Teilen der vorderen Extremi- 

 tätenanlage vorkommen. Nach der Isolierung werden die 

 Thymuspartikel mit sterilen Instrumenten in einer feinen Pi- 

 pette oder auf der Spitze einer Lanzette auf ein steriles Deck- 

 gläschen gebracht. Ein Tropfen Lymphe wird sofort darüber 

 gegossen. Nachdem die Lymphe geronnen ist, wird das Deck- 

 gläschen umgestülpt und auf die Aushöhlung eines ausge- 

 schliffenen sterilen Objektträgers gelegt. Um Verdunstung und 

 Infektion zu verhindern, wird ein Paraffinrahmen rings um das 



