RECHERCHES SUR LES ROTIFÈRES 79 



m'a été enseignée par mon ami M. Ed. Chatton. Comme dans 

 le procédé de van Gieson, elle adjoint au colorant nucléaire 

 et au colorant protoplasmique un second colorant acide, qui 

 se fixe surtout sur les substances cuticulaires et le tissu con- 

 jonctif : sur le mastax on obtient les pièces dures en vert, les 

 muscles en rose, les glandes et le protoplasma indifférent en 

 gris verdâtre, et la différenciation est de toute beauté ; sur 

 les grains de sécrétion, les formations ciliaires, elle donne aussi 

 des résultats très intéressants(pl. III). Le mode opératoire, qui 

 doit être suivi de très près, est le suivant : mordançagede 15 à 

 24 h. dans l'alun de fer à 5 %, coloration de 24 à 30 h. dans 

 l'hématoxyline à 1 % (ces durées et ces concentrations sont 

 nécessaires pour ces tissus difficiles à colorer). La différencia- 

 tion est poussée plus ou moins loin suivant le but qu'on se 

 propose, mais elle doit être assez avancée pour que la super- 

 position des colorants ne donne pas une opacité trop grande. 

 Après lavage soigneux, colorer 15 ou 20 minutes dans une 

 solution d'éosine {w. g. de Griibler) saturée dans l'alcool à QS''. 

 Rincer à l'alcool fort. Colorer 0.5 min. à 2 min. dans le licht- 

 griin (F. S. de Griibler) saturé dans l'alcool à 95o. Différencier 

 par l'alcool absolu alcalinisé par une trace d'ammoniaque, 

 qui enlève l'excès de lichtgriin et facilite beaucoup l'élection 

 (s'il y avait excès d'éosine, on pourrait l'enlever par l'alcool 

 additionné d'un peu d'acide acétique). Lavage soigneux au 

 xylol pour enlever toute trace de l'alcool alcalin ou acide. 



J'ai employé une seconde combinaison basée sur le même 

 principe : safranine, orange G, lichtgriin qui a l'avantage d'être 

 plus rapide, de prendre mieux sur les tissus fixés à VAa et 

 donne des résultats encore plus jolis sur les éléments glandu- 

 laires : sur un fond d'un gris neutre, s'il est bien réussi, se déta- 

 chent les gouttes de sécrétion en vert ou en orange, les noyaux 

 en rouge vif, les muscles en rouge orangé (pi. IV). Mais elle 

 est inférieure pour le mastax. On colore dans la safranine (à 

 saturation dans l'eau formolée à 2 %), soit une heure, soit, 

 ce qui vaut mieux, 24 heures avec une différenciation de 



