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uu fatto normale ciò che è invece semplicemente da attribuirsi a difetto della pre- 

 parazione. Ed io credo che siano probabilmente alterazioni simili molte di quelle 

 diverse forme a fuso, a pera, ecc. di corpuscoli rossi del sangue che da parecchi 

 autori furono tenute e descritte come normali. 



La seconda precauzione sta nell'agire per la fissazione con la massima prestezza. 

 Bisogna evitare assolutamente che il sangue si essichi di per se stesso sul vetrino. 

 Se ciò avviene gli elementi tutti, e specialmente i loro nuclei, ne subiscono danno. 

 I granuli di cromatina quasi si dissolvono, si fondono assieme perdendo la loro in- 

 dividualità ed il nucleo appare perciò quale una massa a contorno un po' irregolare, 

 in cui si possono talvolta ancora riconoscere dei granuli di cromatina non alterati, 

 ma che di solito si tinge di colore piìi sbiadito ed uniforme. Sono insomma quelle 

 alterazioni a cui già accennarono Ebeeth e Schimmelbusch (5), che MIiller (36) 

 per il sangue degli anfibi (p. 227, taf. V, fig. 1-12) ed io (13) per quello della lam- 

 preda (p. 243, fig. 19, 20) abbiamo descritto e figurato. 



Di solito dopo l'essiccamento si raccomanda di passare il vetrino in qualche 

 fissatore, come acido osmico, acido picrico, sublimato, alcool, ecc. Ma io ho trovato 

 ciò perfettamente superfluo. Il calore agisce già esso stesso come fissatoi'e, coagulando 

 tutte le sostanze albuminoidi e, quando queste sono già così coagulate, non so come 

 possano gli altri reattivi ora citati avere ancora un'azione efficace. Perciò io passo 

 il sangue seccato direttamente alla colorazione. 



lo uso semplicemente una soluzione satura, in acqua distillata, riscaldata a 

 bagnomaria, di azzurro di metilene, B, X della '' Badische Anilin- und Sodafabrik .. 

 Non è necessario filtrarla: anzi, tengo sul fondo del recipiente in cui la conservo 

 uno strato di sostanza colorante in eccesso per essere così certo di averne sempre 

 una soluzione satura. 



Distendo allora sul sangue una o due goccie di questa soluzione in modo da 

 coprimela di un sottil velo e ve la lascio agire per un solo minuto primo. 

 Poi lavo abbondantemente con acqua distillata finche sia sottratta tutta la colora- 

 zione in eccesso, e l'acqua dopo la lavatura sia incolora come prima. 11 che avviene 

 molto presto. Copro allora il preparato con un vetrino copri-oggetti ben pulito, evi- 

 tando che rimanga tra i due vetrini neppure la minima bollicina d'aria. Ciò si ottiene 

 molto facilmente se si ha cura di coprire il preparato lasciando sul porta-oggetti 

 uno strato d'acqua piuttosto abbondante. Ciò fatto, si sottrae quest'eccesso d'acqua 

 con carta bibula finche il vetrino porta-oggetti rimanga così aderente al porta-oggetti 

 da non smuoversi piìi. Poi luto con olio d'oliva per mezzo di un pennello ed il pre- 

 parato è così pronto per l'osservazione. 



Gli elementi del sangue si trovano dunque immersi nell'acqua e non si possono 

 perciò conservare a lungo. Tuttavia, se il copri-oggetti è stato lutato con cura, l'olio 

 d'oliva chiude ermeticamente, l'acqua non evapora od il pi-eparato si può conservare 

 per quattro o cinque giorni senza che avvengano alterazioni notevoli. Trascorso 

 questo tempo incominciano quei processi di putrefazione che sono inevitabili per so- 

 stanze organiche tenute nell'acqua: la colorazione, prima ben localizzata, si diff'onde 

 lentamente: i nuclei a poco a poco si distruggono ed il preparato è inservibile. 



Certo questo è un inconveniente, ma esso è compensato largamente dalla chia- 

 rezza dei particolari che vi si scorgono, perchè non solamente viene colorato il nucleo. 



